Натыйжалуучиркейлерди көзөмөлдөөжана алар алып жүрүүчү ооруларды азайтуу, химиялык пестициддерге стратегиялык, туруктуу жана экологиялык жактан таза альтернативалар керек.Биз кээ бир Brassicaceae (үй-бүлө Brassica) урук тамак Египеттин Aedes (L., 1762) менен күрөшүүдө пайдалануу үчүн биологиялык активдүү эмес glucosinolates enzymatic гидролиз менен өндүрүлгөн өсүмдүктөрдөн алынган isothiocyanates булагы катары бааланган.Беш майсыздандырылган урук уну (Brassica juncea (L) Czern., 1859, Lepidium sativum L., 1753, Sinapis alba L., 1753, Thlaspi arvense L., 1753 жана Thlaspi arvense – термикалык деактивациялоонун үч негизги түрү жана химиялык деактивациялоо. продуктылар 24 сааттык экспозицияда аллил изотиоцианат, бензил изотиоцианат жана 4-гидроксибензилизотиоцианаттын уулуулугун (LC50) аныктоо үчүн Aedes aegypti личинкаларына = 0,04 г/120 мл dH2O).LC50 кычы, ак кычы жана ат куйругу үчүн баалуулуктар.үрөн уну 0,05, 0,08 жана 0,05 тиешелүүлүгүнө жараша allyl isothiocyanate (LC50 = 19,35 ppm) жана 4. -Hydroxybenzylisothiocyanate (LC50 = 55,41 ppm) 24 ml.H 24 ml.O 201 г / H 2 дан кийин дарылоо аркылуу личинкаларга көбүрөөк уулуу болгон.Шол нетижелер ёрунжа тохумынын ондурилишине лайык гелйэр.Бензил эфирлеринин жогорку натыйжалуулугу эсептелген LC50 маанилерине туура келет.Үрөн унун колдонуу чиркейлерди башкаруунун натыйжалуу ыкмасын камсыз кыла алат.крест гүлүнүн үрөнүнүн порошокунун жана анын негизги химиялык компоненттеринин чиркей личинкаларына каршы эффективдүүлүгү жана крест гүлүнүн порошокундагы табигый кошулмалар чиркейлерге каршы күрөшүү үчүн келечектүү экологиялык таза личинка катары кызмат кыла аларын көрсөтөт.
Aedes чиркейлери менен шартталган вектордук оорулар коомдук саламаттыкты сактоонун негизги глобалдык көйгөйү бойдон калууда.Чиркейлер аркылуу жуккан оорулар географиялык жактан жайылып1,2,3 жана кайра пайда болуп, оор оорулардын4,5,6,7 чыгышына алып келет.Адамдардын жана жаныбарлардын арасында оорулардын (мисалы, чикунгунья, денге, Рифт өрөөнү, сары безгек жана Зика вирусу) таралышы болуп көрбөгөндөй болуп саналат.Денге ысытмасынын өзү эле тропикалык аймактарда болжол менен 3,6 миллиард адамды жуктуруп алуу коркунучун жаратат, болжол менен жыл сайын 390 миллион инфекция пайда болот, натыйжада жылына 6,100-24,300 адам өлөт8.Зика вирусунун Түштүк Америкада кайрадан пайда болушу жана жайылышы, оорулуу аялдардан төрөлгөн балдардын мээсинин жабыркашы менен дүйнө жүзү боюнча көңүл бурду.Кремер жана башкалар 3 Aedes чиркейлеринин географиялык диапазону кеңейе берерин жана 2050-жылга карата дүйнө калкынын жарымы чиркейлер аркылуу жугуучу арбовирустарды жуктуруп алуу коркунучуна дуушар болот деп болжолдошууда.
Денге жана сары безгекке каршы жакында иштелип чыккан вакциналарды кошпогондо, чиркейлер аркылуу жугуучу оорулардын көбүнө каршы вакциналар али иштелип чыга элек9,10,11.Вакциналар дагы эле чектелген санда бар жана алар клиникалык сыноолордо гана колдонулат.Синтетикалык инсектициддерди колдонуу менен чиркейлерди таратуучуларга каршы күрөшүү чиркейлер аркылуу жуккан оорулардын жайылышын көзөмөлдөөнүн негизги стратегиясы болуп калды12,13.Синтетикалык пестициддер чиркейлерди жок кылууда эффективдүү болсо да, синтетикалык пестициддерди улантуу колдонуу максатсыз организмдерге терс таасирин тийгизип, айлана-чөйрөнү булгайт14,15,16.Андан да коркунучтуу чиркейлердин химиялык инсектициддерге туруктуулугун жогорулатуу тенденциясы17,18,19.Пестициддер менен байланышкан бул көйгөйлөр оорунун тараткычтарын көзөмөлдөө үчүн эффективдүү жана экологиялык жактан таза альтернативаларды издөөнү тездетти.
Зыянкечтерге каршы күрөшүү үчүн фитопестициддердин булагы катары ар кандай өсүмдүктөр иштелип чыккан20,21.Өсүмдүк заттары жалпысынан экологиялык жактан таза, анткени алар биологиялык жактан ажыроочу жана сүт эмүүчүлөр, балыктар жана жерде-сууда жашоочулар сыяктуу максатсыз организмдер үчүн аз же азыраак уулуулугу бар20,22.Чөптөн жасалган препараттар чиркейлердин ар кандай жашоо баскычтарын эффективдүү башкаруу үчүн ар кандай механизмдери бар ар кандай биоактивдүү кошулмаларды чыгарары белгилүү.Эфир майлары жана башка активдүү өсүмдүк ингредиенттери сыяктуу өсүмдүктөн алынган кошулмалар көңүл буруп, чиркейлердин векторлорун көзөмөлдөө үчүн инновациялык куралдарга жол ачты.Эфир майлары, монотерпендер жана сесквитерпендер репелленттер катары иштешет, тоскучтарды жана овициддерди азыктандыруучулар27,28,29,30,31,32,33.Көптөгөн өсүмдүк майлары чиркейлердин личинкаларынын, куурчактарынын жана чоңдордун өлүмүнө себеп болот34,35,36, курт-кумурскалардын нерв, дем алуу, эндокриндик жана башка маанилүү системаларына таасир этет37.
Акыркы изилдөөлөр горчица өсүмдүктөрүн жана алардын уруктарын биоактивдүү кошулмалардын булагы катары колдонуунун мүмкүнчүлүктөрү жөнүндө түшүнүк берди.Горчица данынын уну биофумигант катары сыналган38,39,40,41 жана отоо чөптөрдү жок кылуу42,43,44 жана топурактан жуккан өсүмдүктөрдүн козгогучтарын көзөмөлдөө үчүн45,46,47,48,49,50, өсүмдүктөрдү азыктандыруу үчүн топурактын толуктоосу катары колдонулган.нематоддор 41,51, 52, 53, 54 жана зыянкечтер 55, 56, 57, 58, 59, 60. Бул үрөн порошоктарынын фунгициддик активдүүлүгү изотиоцианаттар деп аталган өсүмдүктөрдү коргоочу кошулмаларга таандык38,42,60.Өсүмдүктөрдө бул коргоочу кошулмалар өсүмдүк клеткаларында биоактивдүү эмес глюкозинолаттар түрүндө сакталат.Бирок, өсүмдүктөр курт-кумурскалардын азыктануусунан же патогендик инфекциядан жабыркаганда, глюкозинолаттар мирозиназа аркылуу биоактивдүү изоцианаттарга55,61 гидролизденет.Изотиоцианаттар кең спектрдеги микробго каршы жана инсектициддик активдүүлүккө ээ болгон учуучу кошулмалар болуп саналат жана алардын түзүлүшү, биологиялык активдүүлүгү жана мазмуну Brassicaceae түрлөрүнүн арасында кеңири айырмаланат42,59,62,63.
Горчица уругунан алынган изотиоцианаттар инсектициддик активдүүлүккө ээ болгону менен, медициналык жактан маанилүү муунак буттууларга каршы биологиялык активдүүлүк жөнүндө маалыматтар жетишсиз.Биздин изилдөөбүз Aedes чиркейлерине каршы төрт майсыздандырылган үрөн порошоктун ларвициддик активдүүлүгүн изилдеп чыкты.Aedes aegypti личинкалары.Изилдөөнүн максаты чиркейлер менен күрөшүү үчүн экологиялык таза биопестициддер катары алардын потенциалдуу колдонулушун баалоо болгон.Үрөн унунун үч негизги химиялык компоненттери, аллил изотиоцианат (AITC), бензил изотиоцианат (BITC) жана 4-гидроксибензилизотиоцианат (4-HBITC) да чиркей личинкаларында бул химиялык компоненттердин биологиялык активдүүлүгүн текшерүү үчүн сыналган.Бул төрт капуста үрөнүнүн порошоктун жана алардын негизги химиялык компоненттеринин чиркей личинкаларына каршы натыйжалуулугун баалаган биринчи отчет.
Aedes aegypti (Rockefeller штаммы) лабораториялык колониялары 26°C, 70% салыштырмалуу нымдуулукта (RH) жана 10:14 саатта (L:D фотопериодунда) сакталган.Жупташкан ургаачылар пластикалык клеткаларга (бийиктиги 11 см жана диаметри 9,5 см) жайгаштырылып, бодо малдын цитрацияланган канын (HemoStat Laboratories Inc., Dixon, CA, АКШ) колдонуу менен бөтөлкөдөн тамактандыруу системасы аркылуу азыктандырылды.Кан менен азыктандыруу адаттагыдай эле температура менен айлануучу суу ваннасынын түтүгүнө (HAAKE S7, Thermo-Scientific, Waltham, MA, АКШ) туташтырылган мембраналык көп айнек фидер (Chemglass, Life Sciences LLC, Vineland, NJ, USA) аркылуу жүргүзүлдү. көзөмөлдөө 37 °C.Ар бир айнек берүүчү камеранын түбүнө Parafilm M пленкасын тартыңыз (аянты 154 мм2).Ар бир азыктандыруучу андан кийин жупталуучу ургаачыны камтыган клетканы жаап турган үстүнкү торго коюлду.Болжол менен 350–400 мкл бодо малдын каны Пастер пипеткасы (Fisherbrand, Fisher Scientific, Waltham, MA, АКШ) аркылуу айнек берүүчү воронкага кошулуп, чоң курттарга кеминде бир саат агып чыгууга уруксат берилди.Андан кийин кош бойлуу аялдарга 10% сахарозанын эритмеси берилип, жумурткаларын өзүнчө тунук суфле чөйчөктөрүнө салынган нымдуу чыпкалуу кагазга таштоого уруксат берилди (1,25 фл унция өлчөмү, Dart Container Corp., Мейсон, MI, АКШ).суу менен капас.Жумурткалары бар фильтр кагазын жабылган баштыкка (SC Johnsons, Racine, WI) салып, 26°C температурада сактаңыз.Жумурткалар жарылып, болжол менен 200–250 личинка коёндун чою (ZuPreem, Premium Natural Products, Inc., Mission, KS, АКШ) жана боор порошогу (MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, АКШ).жана балык филеси (TetraMin, Tetra GMPH, Meer, Германия) 2:1:1 катышында.Биздин биоанализибизде кеч үчүнчү тепкич личинкалары колдонулган.
Бул изилдөөдө колдонулган өсүмдүк үрөн материалы төмөнкү коммерциялык жана мамлекеттик булактардан алынган: Brassica juncea (күрөң кычы-Тынч океан алтыны) жана Brassica juncea (ак горчица-Ида алтыны) Тынч океандын түндүк-батыш фермерлер кооперативинен, Вашингтон штаты, АКШ;(Garden Cress) Kelly Seed and Hardware Co., Peoria, IL, USA жана Thlaspi arvense (Field Pennycress-Elisabeth) USDA-ARS, Пеория, IL, АКШ;Изилдөөдө колдонулган үрөндөрдүн бири да пестициддер менен дарыланган эмес.Бардык үрөн материалдары жергиликтүү жана улуттук эрежелерге ылайык жана бардык тиешелүү жергиликтүү мамлекеттик жана улуттук эрежелерге ылайык иштетилген жана бул изилдөөдө колдонулган.Бул изилдөө трансгендик өсүмдүктөрдүн сортторун изилдеген эмес.
Brassica juncea (PG), беде (Ls), ак кычы (IG), Thlaspi arvense (DFP) уруктары 0,75 мм тор жана дат баспас баспас менен жабдылган Retsch ZM200 ультра борбордон четтөөчү тегирмендин (Retsch, Haan, Германия) жардамы менен майда порошокко чейин майдаланган. болоттон жасалган ротор, 12 тиш, 10000 айн/мин (таблица 1).Майдаланган урук порошок кагаз тишке которулуп, 24 саат бою Сокслет аппаратында гексан менен майсыздандырылды.Майсыздандырылган талаа горчицасынын үлгүсү 1 саат бою 100 °C температурада иштетилип, мирозиназаны денатурациялоо жана биологиялык активдүү изотиоцианаттарды пайда кылуу үчүн глюкозинолаттардын гидролизинин алдын алуу.Жылуулук менен иштетилген ат куйрук урук порошок (DFP-HT) myrosinase denaturing менен терс башкаруу катары колдонулган.
Майсыздандырылган үрөн унундагы глюкозанын мазмуну мурда жарыяланган 64 протоколуна ылайык жогорку натыйжалуу суюк хроматографияны (HPLC) колдонуу менен үч нускада аныкталган.Кыскача айтканда, майсыздандырылган үрөн порошокунун 250 мг үлгүсүнө 3 мл метанол кошулду.Ар бир үлгү 30 мүнөт суу мончодо sonicated жана 16 саат бою 23 ° C караңгыда калтырылган.Андан кийин органикалык катмардын 1 мл аликвоту 0,45 мкм фильтр аркылуу автоүлгүгө чыпкаланган.Shimadzu HPLC тутумунда (эки LC 20AD насосу; SIL 20A автоүлгүчү; DGU 20As дегазатору; 237 нмде мониторинг жүргүзүү үчүн SPD-20A UV-VIS детектору; жана CBM-20A байланыш шинасы модулу) иштөөдө, урук данындагы глюкозанын курамы аныкталган. үч нускада.Shimadzu LC Solution программасынын 1.25 версиясын колдонуу (Shimadzu Corporation, Колумбия, MD, АКШ).Колонна C18 Inertsil тескери фазалуу мамыча болгон (250 мм × 4,6 мм; RP C-18, ODS-3, 5u; GL Sciences, Torrance, CA, АКШ).Алгачкы мобилдик фаза шарттары суудагы 12% метанол/88% 0,01 М тетрабутиламоний гидроксиди (TBAH; Сигма-Олдрих, Сент-Луис, MO, АКШ) агымы 1 мл/мин.15 мкл үлгүнү инъекциялоодон кийин, баштапкы шарттар 20 мүнөт сакталып, андан кийин эриткичтин катышы 100% метанолго туураланган, үлгүнү талдоонун жалпы убактысы 65 мүнөт.Майсыздандырылган үрөн унундагы күкүрттүн курамын баалоо үчүн жаңы даярдалган синапин, глюкозинолат жана мирозин стандарттарын (Сигма-Олдрих, Сент-Луис, МО, АКШ) катар суюлтуу аркылуу стандарттуу ийри сызык (nM/mAb негизинде) түзүлдү.глюкозинолаттар.Үлгүлөрдөгү глюкоза концентрациялары Agilent 1100 HPLCде (Agilent, Santa Clara, CA, USA) OpenLAB CDS ChemStation версиясын (C.01.07 SR2 [255]) колдонуп, ошол эле тилке менен жабдылган жана мурда сүрөттөлгөн ыкманы колдонуу менен сыналган.Глюкозинолаттын концентрациялары аныкталды;HPLC системалары менен салыштырууга болот.
Allyl isothiocyanate (94%, туруктуу) жана бензил изотиоцианат (98%) Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, АКШ) сатып алынган.4-Hydroxybenzylisothiocyanate ChemCruz (Santa Cruz Biotechnology, CA, АКШ) сатып алынган.Мирозиназа ферменттик жол менен гидролизденгенде глюкозинолаттар, глюкозинолаттар жана глюкозинолаттар тиешелүүлүгүнө жараша аллил изотиоцианатты, бензилизотиоцианатты жана 4-гидроксибензилизотиоцианатты түзөт.
Лабораториялык биоанализдар Мутури жана башкалар методу боюнча жургузулду.32 өзгөртүүлөр менен.Изилдөөдө беш аз майлуу үрөн тоюттары колдонулган: DFP, DFP-HT, IG, PG жана Ls.Жыйырма личинка 120 мл деионизацияланган сууну (dH2O) камтыган 400 мл бир жолу колдонулуучу үч тараптуу стаканга (VWR International, LLC, Radnor, PA, АКШ) салынган.Жети урук унун концентрациясы чиркей личинкасынын уулуулугуна сыналды: DFP урук уну , DFP-HT, IG жана PG үчүн 0,01, 0,02, 0,04, 0,06, 0,08, 0,1 жана 0,12 г урук уну/120 мл dH2O.Алдын ала биологиялык анализдер майсыздандырылган Ls урук уну текшерилген башка төрт урук унуна караганда уулуураак экенин көрсөтүп турат.Ошондуктан, биз Ls урук унунун жети дарылоо концентрациясын төмөнкү концентрацияларга туураладык: 0,015, 0,025, 0,035, 0,045, 0,055, 0,065 жана 0,075 г/120 мл dH2O.
Анализ шарттарында курт-кумурскалардын нормалдуу өлүмүнө баа берүү үчүн тазаланбаган контролдук топ (dH20, үрөн уну жок) киргизилген.Ар бир урук уну үчүн токсикологиялык биоанализге үч кайталануучу үч эңкейиш стакан (ар бир стаканга 20 кеч үчүнчү доордун личинкалары) кирген, бардыгы 108 флакон.Дарыланган контейнерлер бөлмө температурасында (20-21°C) сакталган жана личинкалардын өлүмү дарылоо концентрациясынын үзгүлтүксүз таасири 24 жана 72 саат ичинде катталган.Эгерде дат баспас болоттон жасалган жука шпатель менен тешилгенде же тийгенде чиркейдин денеси жана кошумчалары кыймылдабаса, чиркейдин личинкалары өлдү деп эсептелет.Өлгөн личинкалар адатта идиштин түбүндө же суунун бетинде арка же вентралдык абалда кыймылсыз турушат.Эксперимент личинкалардын ар кандай топторун колдонуу менен ар кандай күндөрдө үч жолу кайталанган, бардыгы болуп 180 личинка ар бир дарылоо концентрациясына дуушар болгон.
AITC, BITC жана 4-HBITC чиркей личинкаларына уулуулугу ошол эле биоанализ процедурасын колдонуу менен, бирок ар кандай дарылоо менен бааланган.Ар бир химиялык зат үчүн 100 000 ppm камдык эритмелерди даярдаңыз, 100 мкл химиялык затты 900 мкл абсолюттук этанолго 2 мл центрифуга түтүкчөсүнө кошуп, жакшылап аралаштыруу үчүн 30 секунд чайкаңыз.Дарылоо концентрациялары BITC AITC жана 4-HBITCге караганда алда канча уулуураак деп табылган биздин алдын ала биоанализдердин негизинде аныкталган.Уулуулугун аныктоо үчүн 5 BITC концентрациясы (1, 3, 6, 9 жана 12 промилле), 7 концентрациясы AITC (5, 10, 15, 20, 25, 30 жана 35 промилле) жана 6 концентрациясы 4-HBITC (15) , 15, 20, 25, 30 жана 35 промилле).30, 45, 60, 75 жана 90 промилле).Контролдук дарылоого 108 мкл абсолюттук этанол сайылган, бул химиялык тазалоонун максималдуу көлөмүнө барабар.Биологиялык анализдер жогорудагыдай кайталанып, ар бир дарылоо концентрациясында жалпысынан 180 личинка табылган.Личинкалардын өлүмү 24 саат үзгүлтүксүз экспозициядан кийин AITC, BITC жана 4-HBITC ар бир концентрациясы үчүн катталган.
50% өлүмгө дуушар болгон концентрацияны (LC50), 90% өлүмгө алып баруучу концентрацияны (LC90), эңкейишти, өлүмгө алып келүүчү доза коэффициентин жана 95ти эсептөө үчүн 65 дозага байланыштуу өлүмгө байланыштуу маалыматтардын пробиттик анализи Polo программасынын (Polo Plus, LeOra Software, версия 1.0) жардамы менен аткарылган. % өлүмгө алып келүүчү концентрация.лог-трансформацияланган концентрация жана доза-өлүм ийри сызыктары үчүн өлүмгө алып келүүчү дозанын катышы үчүн ишеним интервалдарына негизделген.Өлүм боюнча маалыматтар ар бир дарылоо концентрациясына дуушар болгон 180 личинкалардын бириккен кайталанма маалыматтарына негизделген.Ыктымалдык талдоо ар бир урук уну жана ар бир химиялык компонент үчүн өзүнчө жүргүзүлдү.Өлтүрүүчү дозанын катышынын 95% ишеним аралыгынын негизинде, чиркейдин личинкаларына урук унун жана химиялык компоненттеринин уулуулугу бир кыйла айырмаланган деп эсептелген, ошондуктан 1 маанисин камтыган ишеним аралыгы олуттуу айырмаланган эмес, P = 0,0566.
Майсыздандырылган DFP, IG, PG жана Ls урук унунун негизги глюкозинолаттарын аныктоо үчүн HPLC натыйжалары 1-таблицада келтирилген. Сыналган үрөн ундарындагы негизги глюкозинолаттар DFP жана PGден башкасы ар кандай болгон, алардын экөө тең мирозиназа глюкозинолаттарын камтыган.PG myrosinin мазмуну DFP караганда жогору болгон, тиешелүүлүгүнө жараша, 33,3 ± 1,5 жана 26,5 ± 0,9 мг / г.Ls үрөн порошок 36,6 ± 1,2 мг / г glucoglycone камтылган, ал эми IG үрөн порошок 38,0 ± 0,5 мг / г sinapine камтыган.
Ae личинкалары.Aedes aegypti чиркейлери майсыздандырылган урук унуну менен дарыланганда өлтүрүлгөн, бирок дарылоонун эффективдүүлүгү өсүмдүктөрдүн түрүнө жараша ар кандай болгон.Бир гана DFP-NT 24 жана 72 сааттан кийин чиркей личинкаларына уулуу болгон эмес (2-таблица).активдүү үрөн порошок уулуулугун жогорулатуу концентрациясы менен көбөйгөн (сүрөт 1A, B).Үрөн унун чиркей личинкаларына уулуулугу 24 сааттык жана 72 сааттык баалоодо LC50 маанилеринин өлүмгө алып келүүчү дозасынын катышынын 95% CI негизинде олуттуу өзгөрдү (3-таблица).24 сааттан кийин Ls урук унун уулуу таасири башка урук уну менен дарылоого караганда көбүрөөк болгон, личинкаларга эң жогорку активдүүлүк жана максималдуу уулуулугу (LC50 = 0,04 г/120 мл dH2O).Личинкалар 24 саатта DFPге IG, Ls жана PG урук порошок менен дарылоого салыштырмалуу азыраак сезгич болгон, LC50 маанилери тиешелүүлүгүнө жараша 0,115, 0,04 жана 0,08 г/120 мл dH2O, алар LC50 маанисинен статистикалык жактан жогору болгон.0,211 г/120 мл dH2O (3-таблица).DFP, IG, PG жана Ls LC90 маанилери тиешелүүлүгүнө жараша 0,376, 0,275, 0,137 жана 0,074 г/120 мл dH2O болгон (2-таблица).DPP эң жогорку концентрациясы 0,12 г/120 мл dH2O болгон.24 сааттык баалоодон кийин личинкалардын орточо өлүмү болгону 12%ды түздү, ал эми IG жана PG личинкаларынын орточо өлүмү тиешелүүлүгүнө жараша 51% жана 82%га жетти.24 сааттык баалоодон кийин, Ls үрөн уну менен дарылоонун эң жогорку концентрациясы үчүн личинкалардын өлүмүнүн орточо көрсөткүчү (0,075 г/120 мл dH2O) 99% түздү (1А-сүрөт).
Өлүмдүн ийри сызыктары Ae дозасына жооп берүүдөн (Probit) бааланган.Мисир личинкалары (3-кылымдын личинкалары) дарылоодон кийин 24 сааттан кийин (A) жана 72 сааттан (B) урук уну концентрациясына чейин.чекиттүү сызык үрөн унун дарылоонун LC50 билдирет.DFP Thlaspi arvense, DFP-HT Heat inactivated Thlaspi arvense, IG Sinapsis alba (Ida Gold), PG Brassica juncea (Pacific Gold), Ls Lepidium sativum.
72 сааттык баалоодо DFP, IG жана PG урук унун LC50 маанилери тиешелүүлүгүнө жараша 0,111, 0,085 жана 0,051 г/120 мл dH2O болгон.Ls урук унуна дуушар болгон дээрлик бардык личинкалар 72 сааттан кийин өлүшкөн, андыктан өлүмдүн маалыматтары Probit анализине дал келбеген.Башка үрөн уну менен салыштырганда, личинкалар DFP урук уну менен дарылоого анча сезгич эмес жана LC50 статистикалык жактан жогору болгон (2 жана 3-таблицалар).72 сааттан кийин DFP, IG жана PG үрөн уну менен дарылоо үчүн LC50 маанилери тиешелүүлүгүнө жараша 0,111, 0,085 жана 0,05 г/120 мл dH2O деп бааланган.72 сааттык баалоодон кийин DFP, IG жана PG үрөн порошоктарынын LC90 маанилери тиешелүүлүгүнө жараша 0,215, 0,254 жана 0,138 г/120 мл dH2O болгон.72 сааттык баалоодон кийин, 0,12 г/120 мл dH2O максималдуу концентрациясында DFP, IG жана PG үрөн уну менен дарылоо үчүн личинкалардын орточо өлүмү тиешелүүлүгүнө жараша 58%, 66% жана 96% түздү (сүрөт 1B).72 сааттык баалоодон кийин, PG үрөн уну IG жана DFP урук унуна караганда уулуураак экени аныкталган.
Синтетикалык isothiocyanates, allyl isothiocyanate (AITC), benzyl isothiocyanate (BITC) жана 4-hydroxybenzylisothiocyanate (4-HBITC) натыйжалуу чиркей личинкаларын жок кыла алат.Дарылоодон кийин 24 сааттан кийин BITC личинкалар үчүн уулуураак болгон LC50 мааниси 5,29 промилледен AITC үчүн 19,35 промилледен жана 4-HBITC үчүн 55,41 промилледен (4-таблица).AITC жана BITC менен салыштырганда, 4-HBITC төмөн уулуулугун жана жогорку LC50 мааниге ээ.Эң күчтүү үрөн унундагы эки негизги изоцианаттардын (Ls жана PG) чиркей личинкаларынын уулуулугунда олуттуу айырмачылыктар бар.AITC, BITC жана 4-HBITC ортосундагы LC50 көрсөткүчтөрүнүн өлүмгө алып келүүчү доза катышына негизделген уулуулугу статистикалык айырманы көрсөттү, LC50 өлтүрүүчү дозанын катышынын 95% CI 1 маанисин камтыбайт (P = 0,05, таблица). 4).BITC жана AITC экөө тең эң жогорку концентрациялары текшерилген личинкалардын 100% жок кылат деп бааланган (2-сүрөт).
Өлүмдүн ийри сызыктары Ae дозасына жооп берүүдөн (Probit) бааланган.Дарылоодон 24 саат өткөндөн кийин египет личинкалары (3-кылымдын личинкалары) синтетикалык изоцианат концентрациясына жеткен.чекиттүү сызык isothiocyanate дарылоо үчүн LC50 билдирет.Бензил изотиоцианаты BITC, аллил изотиоцианаты AITC жана 4-HBITC.
Өсүмдүк биопестициддерин чиркейлердин векторлорун көзөмөлдөө агенттери катары колдонуу көптөн бери изилденген.Көптөгөн өсүмдүктөр инсектициддик активдүүлүгү бар табигый химиялык заттарды чыгарышат37.Алардын биоактивдүү кошулмалары зыянкечтерге, анын ичинде чиркейлерге каршы күрөшүүдө чоң потенциалы бар синтетикалык инсектициддерге жагымдуу альтернатива болуп саналат.
Горчица өсүмдүктөрү алардын уруктары үчүн өсүмдүк катары өстүрүлөт, татымал жана май булагы катары колдонулат.Горчица майын уруктарынан алууда же биоотун катары пайдалануу үчүн горчица 69 алынганда, кошумча продукт майсыздандырылган урук уну болуп саналат.Бул үрөн уну көптөгөн табигый биохимиялык компоненттерин жана гидролитикалык ферменттерди сактап калат.Бул үрөн унун уулуулугу isothiocyanates55,60,61 өндүрүү менен байланыштуу.Изотиоцианаттар урук унун гидратациялоодо мирозиназа ферменти тарабынан глюкозинолаттардын гидролизинен пайда болот38,55,70 жана фунгициддик, бактерициддик, нематициддик жана инсектициддик таасирлерге, ошондой эле химиялык сезгич жана химиотерапевтик касиеттерге ээ болгон башка касиеттерге ээ экендиги белгилүү61, 70.Бир нече изилдөөлөр горчица өсүмдүктөрү жана урук уну топуракка жана сакталган тамак-аш зыянкечтерине каршы фумигант катары эффективдүү иштээрин көрсөттү57,59,71,72.Бул изилдөөдө биз төрт урук унун жана анын үч биоактивдүү продуктусу AITC, BITC жана 4-HBITC Aedes чиркей личинкаларына уулуулугун бааладык.Aedes aegypti.Чиркей личинкаларын камтыган сууга түздөн-түз урук унун кошуу чиркей личинкаларына уулуу болгон изотиоцианаттарды өндүрүүчү ферменттик процесстерди активдештирет деп күтүлүүдө.Бул биотрансформация жарым-жартылай үрөн унун байкалган ларвициддик активдүүлүгү жана инсектициддик активдүүлүктүн жоголушу менен көрсөтүлдү, качан эргежээл кычы уругу унун колдонуудан мурун жылуулук менен иштетилгенде.Жылуулук менен дарылоо глюкозинолаттарды активдештирүүчү гидролитикалык ферменттерди жок кылуусу күтүлүүдө, ошону менен биоактивдүү изоцианаттардын пайда болушуна жол бербейт.Бул суу чөйрөсүндө чиркейлерге каршы капуста уругу порошоктун инсектициддик касиеттерин тастыктаган биринчи изилдөө.
Сыналган үрөн порошокторунун ичинен суу териси урук порошок (Ls) эң уулуу болуп, Aedes albopictus жогорку өлүмүнө алып келген.Aedes aegypti личинкалары 24 саат бою үзгүлтүксүз иштетилди.Калган үч үрөн порошоктору (PG, IG жана DFP) жайыраак активдүүлүккө ээ болгон жана 72 саат үзгүлтүксүз дарылоодон кийин дагы олуттуу өлүмгө алып келген.Ls урук уну гана глюкозинолаттардын олуттуу көлөмүн камтыган, ал эми PG жана DFPде мирозиназа жана IG негизги глюкозинолат катары глюкозинолатты камтыган (1-таблица).Глюкотропеолин BITCге жана синальбин 4-HBITC61,62ге чейин гидролизденет.Биздин биоанализдин натыйжалары Ls урук уну да, синтетикалык BITC да чиркей личинкаларына өтө уулуу экенин көрсөтүп турат.PG жана DFP урук унун негизги компоненти AITC үчүн гидролизденген мирозиназа глюкозинолат болуп саналат.AITC LC50 19,35 промилле болгон чиркей личинкаларын жок кылууда натыйжалуу.AITC жана BITC менен салыштырганда, 4-HBITC isothiocyanate личинкалар үчүн аз уулуу болуп саналат.AITC BITCге караганда азыраак уулуу болгону менен, алардын LC50 баалуулуктары чиркей личинкаларында сыналган көптөгөн эфир майларынан төмөн32,73,74,75.
Чиркей личинкаларына каршы колдонуу үчүн биздин cruciferous урук порошок HPLC тарабынан аныкталган жалпы glucosinolates 98-99% дан ашыгын түзөт, бир негизги glucosinolate камтыйт.Башка глюкозинолаттардын изи көлөмү аныкталган, бирок алардын деңгээли жалпы глюкозинолаттардын 0,3% дан азын түзгөн.Суу кресс (L. sativum) урук порошокунда экинчилик глюкоза (синигрин) бар, бирок алардын үлүшү жалпы глюкозинолаттардын 1% түзөт, ал эми алардын курамы дагы деле анчалык деле чоң эмес (болжол менен 0,4 мг/г урук порошок).PG жана DFP бир эле негизги глюкозинолат (мирозин) камтыса да, алардын урук тамактарынын larvicidal активдүүлүгү алардын LC50 баалуулуктарына байланыштуу олуттуу айырмаланат.Порошок көктөргө уулуулугу боюнча айырмаланат.Aedes aegypti личинкаларынын пайда болушу мирозиназа активдүүлүгүндөгү айырмачылыктарга же эки үрөн азыктарынын ортосундагы туруктуулукка байланыштуу болушу мүмкүн.Мирозиназанын активдүүлүгү Brassicaceae өсүмдүктөрүндө изотиоцианаттар сыяктуу гидролиздик продуктулардын биожеткиликтүүлүгүндө маанилүү роль ойнойт76.Pocock et al.77 жана Wilkinson et al.78 тарабынан мурунку отчеттор myrosinase иш жана туруктуулук өзгөрүүлөр, ошондой эле генетикалык жана экологиялык себептер менен байланыштуу болушу мүмкүн экенин көрсөттү.
Күтүлгөн биоактивдүү изоцианат мазмуну тиешелүү химиялык колдонмолор менен салыштыруу үчүн 24 жана 72 саатта ар бир урук уну LC50 маанилеринин негизинде эсептелген (таблица 5).24 сааттан кийин үрөн унундагы изотиоцианаттар таза кошулмаларга караганда уулуураак болгон.Изотиоцианат уруктарын дарылоонун миллиондогон бөлүктөрү (ppm) негизинде эсептелген LC50 баалуулуктары BITC, AITC жана 4-HBITC колдонмолору үчүн LC50 маанилеринен төмөн болгон.Биз личинкалардын үрөн уну гранулдарын жегенин байкадык (Figure 3A).Демек, личинкалар үрөн унун гранулдарын жутуу аркылуу уулуу изоцианаттарга көбүрөөк концентрациялуу таасир этиши мүмкүн.Бул 24 сааттык экспозицияда IG жана PG үрөн уну менен дарылоодо эң айкын болгон, мында LC50 концентрациясы таза AITC жана 4-HBITC дарылоосуна караганда 75% жана 72% төмөн болгон.Ls жана DFP дарылоо таза изоцианатка караганда уулуураак болгон, LC50 маанилери тиешелүүлүгүнө жараша 24% жана 41% төмөн.Контролдук дарылоодогу личинкалар ийгиликтүү куурчактанышты (3B-сүрөт), ал эми үрөн унун дарылоодогу личинкалардын көбү куурчактанган жок жана личинкалардын өнүгүшү олуттуу кечеңдеди (3B,D-сүрөт).Spodopteralitura, isothiocyanates өсүү артта калуу жана өнүгүү кечигүү менен байланышкан79.
Ae личинкалары.Aedes aegypti чиркейлери 24-72 саат бою Brassica үрөнүнүн порошокторуна үзгүлтүксүз тийип турган.А) Ооздорунда урук унун бөлүкчөлөрү бар өлгөн личинкалар (тегеректелген);(B) Контролдук дарылоо (үрөн уну кошулбаган dH20) личинкалардын нормалдуу түрдө өсүп, 72 сааттан кийин куурчактай баштаарын көрсөтөт (C, D) Личинкалар үрөн уну менен дарыланган;урук уну өнүгүүдө айырмачылыктарды көрсөтүп, куурчактанган эмес.
Биз чиркей личинкаларына изотиоцианаттардын уулуу таасиринин механизмин изилдеген жокпуз.Бирок, кызыл оттуу кумурскалардын мурунку изилдөөлөрү (Solenopsis invicta) глутатион S-трансферазанын (GST) жана эстеразанын (EST) ингибирлөө изотиоцианаттын биоактивдүүлүгүнүн негизги механизми экенин көрсөттү, ал эми AITC, атүгүл төмөн активдүүлүктө да GST активдүүлүгүн токтото алат. .аз концентрацияда кызыл импорттук от кумурскалар.Дозасы 0,5 мкг/мл80.Ал эми, AITC жетилген жүгөрү чөптөрүндө (Sitophilus zeamais)81 ацетилхолинэстеразаны ингибирлейт.Окшош изилдөөлөр чиркей личинкаларында изотиоцианаттын активдүүлүгүнүн механизмин түшүндүрүү үчүн жүргүзүлүшү керек.
Реактивдүү изоцианаттарды пайда кылуу үчүн өсүмдүк глюкозинолаттарынын гидролизинин кычы данынын уну менен чиркей личинкаларын көзөмөлдөө механизми катары кызмат кылат деген сунушту колдоо үчүн жылуулук менен активдештирилбеген DFP дарылоосун колдонобуз.DFP-HT урук уну сыналган колдонуу курсу боюнча уулуу болгон эмес.Лафарга жана башкалар.82 glucosinolates жогорку температурада бузулууга сезгич экенин билдирди.Ошондой эле жылуулук менен дарылоо урук унундагы мирозиназа ферментин денатурациялайт жана реактивдүү изотиоцианаттарды пайда кылуу үчүн глюкозинолаттардын гидролизин алдын алат.Муну Окунаде жана башкалар да тастыкташкан.75 мирозиназанын температурага сезгич экенин көрсөттү, бул мирозиназанын активдүүлүгү 80° дан жогору горчица, кара горчица жана кан тамыр уруктары таасир эткенде толугу менен инактивацияланганын көрсөткөн.C. Бул механизмдер жылуулук менен иштетилген DFP урук унунун инсектициддик активдүүлүгүн жоготууга алып келиши мүмкүн.
Ошентип, кычы данынын уну жана анын үч негизги изоцианаттары чиркей личинкалары үчүн уулуу.Үрөн уну менен химиялык дарылоонун ортосундагы айырмачылыктарды эске алуу менен, үрөн унун колдонуу чиркейлерге каршы күрөшүүнүн натыйжалуу ыкмасы болушу мүмкүн.Үрөн порошокторун колдонуунун натыйжалуулугун жана туруктуулугун жогорулатуу үчүн ылайыктуу формулаларды жана эффективдүү жеткирүү системаларын аныктоо зарыл.Биздин натыйжалар синтетикалык пестициддерге альтернатива катары кычы уругу унун потенциалдуу колдонууну көрсөтүп турат.Бул технология чиркейлер менен күрөшүү үчүн инновациялык курал болуп калышы мүмкүн.Чиркейдин личинкалары суу чөйрөсүндө өнүгүп өскөндүктөн жана урук уну глюкозинолаттары гидратациядан кийин ферменттик жол менен активдүү изоцианаттарга айлангандыктан, чиркейлер каптаган сууда кычы данынын унун колдонуу олуттуу контролдук потенциалды сунуш кылат.Изотиоцианаттардын ларвициддик активдүүлүгү ар кандай болсо да (BITC > AITC > 4-HBITC), урук уну бир нече глюкозинолаттар менен айкалыштыруу синергетикалык уулуулукту жогорулатат же жокпу аныктоо үчүн көбүрөөк изилдөө керек.Бул майсыздандырылган крест гүлүнүн урук унун жана үч биоактивдүү изоцианаттардын чиркейлерге инсектициддик таасирин көрсөткөн биринчи изилдөө.Бул изилдөөнүн натыйжалары майсыздандырылган капуста урукунун уну, уруктардан май алууда кошумча продукт болуп саналат, чиркейлер менен күрөшүү үчүн келечектүү ларвициддик агент катары кызмат кыла аларын көрсөтүү менен жаңы негиздерди ачат.Бул маалымат өсүмдүктөрдүн биоконтролдук агенттерин ачууга жана аларды арзан, практикалык жана экологиялык жактан таза биопестициддер катары иштеп чыгууга жардам берет.
Бул изилдөө үчүн түзүлгөн маалымат топтомдору жана натыйжадагы анализдер негиздүү өтүнүч боюнча тиешелүү автордон жеткиликтүү.Изилдөөнүн аягында изилдөөдө колдонулган бардык материалдар (курт-кумурскалар жана үрөн уну) жок кылынды.
Посттун убактысы: 29-июль-2024