Nature.com сайтына киргениңиз үчүн рахмат. Сиз колдонуп жаткан браузердин версиясында CSS колдоосу чектелүү. Эң жакшы натыйжаларга жетүү үчүн, браузериңиздин жаңы версиясын колдонууну сунуштайбыз (же Internet Explorerде Шайкештик режимин өчүрүп коюңуз). Ошол эле учурда, үзгүлтүксүз колдоону камсыз кылуу үчүн, биз сайтты стилдештирбестен же JavaScriptсиз көрсөтүп жатабыз.
Өсүмдүктөрдөн алынган инсектициддик кошулмалардын айкалыштары зыянкечтерге каршы синергетикалык же антагонисттик өз ара аракеттенүүнү көрсөтүшү мүмкүн. Aedes чиркейлери алып жүрүүчү оорулардын тез жайылышын жана Aedes чиркей популяцияларынын салттуу инсектициддерге туруктуулугунун жогорулашын эске алуу менен, өсүмдүк эфир майларына негизделген терпендик кошулмалардын жыйырма сегиз айкалышы түзүлүп, Aedes aegypti личинкалык жана бойго жеткен стадияларына каршы сыналган. Башында беш өсүмдүк эфир майы (ЭЭ) личинкалык жана бойго жеткен өсүмдүктөр үчүн колдонуу эффективдүүлүгүнө бааланган жана GC-MS жыйынтыктарынын негизинде ар бир ЭЭде эки негизги кошулма аныкталган. Негизги аныкталган кошулмалар сатылып алынган, атап айтканда, диалил дисульфид, диалил трисульфид, карвон, лимонен, эвгенол, метил эвгенол, эвкалиптол, эвдесмол жана чиркей альфа-пинен. Андан кийин бул кошулмалардын экилик айкалыштары сублеталдык дозаларды колдонуу менен даярдалган жана алардын синергетикалык жана антагонисттик таасирлери текшерилген жана аныкталган. Эң мыкты личинкага каршы курамдар лимоненди диалил дисульфиди менен аралаштыруу аркылуу, ал эми эң мыкты чоңдорго каршы курамдар карвонду лимонен менен аралаштыруу аркылуу алынат. Коммерциялык максатта колдонулган синтетикалык личинкага каршы Temphos жана чоңдор үчүн Malathion дары-дармеги өзүнчө жана терпеноиддер менен экилик айкалыштарда сыналган. Жыйынтыктар темепос менен диалил дисульфиддин жана малатион менен эвдесмолдун айкалышы эң натыйжалуу айкалыш экенин көрсөттү. Бул күчтүү айкалыштар Aedes aegyptiге каршы колдонууга потенциалдуу.
Өсүмдүк эфир майлары (ӨЭ) ар кандай биоактивдүү кошулмаларды камтыган экинчилик метаболиттер болуп саналат жана синтетикалык пестициддерге альтернатива катары барган сайын маанилүү болуп баратат. Алар экологиялык жактан таза жана колдонууга ыңгайлуу гана эмес, ошондой эле ар кандай биоактивдүү кошулмалардын аралашмасы болуп саналат, бул дары-дармектерге туруктуулуктун пайда болуу ыктымалдыгын азайтат1. GC-MS технологиясын колдонуп, изилдөөчүлөр ар кандай өсүмдүк эфир майларынын курамдык бөлүктөрүн изилдеп, 17 500 жыпар жыттуу өсүмдүктөрдөн2 3000ден ашык кошулманы аныкташкан, алардын көпчүлүгү инсектициддик касиеттери боюнча текшерилген жана инсектициддик таасирге ээ экени кабарланган3,4. Айрым изилдөөлөр кошулманын негизги компонентинин уулуулугу анын чийки этилен кычкылынын уулуулугу менен бирдей же андан жогору экенин белгилейт. Бирок жеке кошулмаларды колдонуу химиялык инсектициддердегидей эле, туруктуулуктун өнүгүшүнө дагы бир жолу мүмкүнчүлүк калтырышы мүмкүн5,6. Ошондуктан, азыркы учурда инсектициддик натыйжалуулукту жогорулатуу жана максаттуу зыянкечтер популяцияларында туруктуулуктун ыктымалдыгын азайтуу үчүн этилен кычкылына негизделген кошулмалардын аралашмаларын даярдоого басым жасалууда. Эфир майларында кездешкен жеке активдүү кошулмалар Эфир майынын жалпы активдүүлүгүн чагылдырган айкалыштарда синергетикалык же антагонисттик таасирлерди көрсөтүшү мүмкүн, бул мурунку изилдөөчүлөр тарабынан жүргүзүлгөн изилдөөлөрдө жакшы баса белгиленген7,8. Векторлорду көзөмөлдөө программасына Эфир майы жана анын компоненттери да кирет. Эфир майларынын чиркейлерге каршы активдүүлүгү Culex жана Anopheles чиркейлеринде кеңири изилденген. Бир нече изилдөөлөр жалпы уулуулукту жогорулатуу жана терс таасирлерин минималдаштыруу үчүн ар кандай өсүмдүктөрдү коммерциялык максатта колдонулган синтетикалык пестициддер менен айкалыштыруу аркылуу натыйжалуу пестициддерди иштеп чыгууга аракет кылышкан9. Бирок мындай кошулмаларды Aedes aegyptiге каршы изилдөө сейрек кездешет. Медицина илиминдеги жетишкендиктер жана дары-дармектердин жана вакциналардын өнүгүшү кээ бир векторлор аркылуу жугуучу оорулар менен күрөшүүгө жардам берди. Бирок Aedes aegypti чиркейи тарабынан жугуучу вирустун ар кандай серотиптеринин болушу эмдөө программаларынын ийгиликсиздигине алып келди. Ошондуктан, мындай оорулар пайда болгондо, векторлорду көзөмөлдөө программалары оорунун жайылышынын алдын алуунун бирден-бир жолу болуп саналат. Азыркы сценарийде Aedes aegypti вирусун көзөмөлдөө абдан маанилүү, анткени ал денге ысытмасын, Зика безгегин, денге геморрагиялык ысытмасын, сары ысытманы ж.б. козгогон ар кандай вирустардын жана алардын серотиптеринин негизги вектору болуп саналат. Эң негизгиси, дээрлик бардык векторлор аркылуу жугуучу Aedes ооруларынын саны Египетте жана дүйнө жүзү боюнча жыл сайын көбөйүп жаткандыгы. Ошондуктан, бул контекстте Aedes aegypti популяциялары үчүн экологиялык жактан таза жана натыйжалуу көзөмөл чараларын иштеп чыгуу зарылдыгы бар. Бул жагынан потенциалдуу талапкерлер - бул EO, алардын курамындагы кошулмалар жана алардын айкалыштары. Ошондуктан, бул изилдөөдө Aedes aegypti вирусуна каршы инсектициддик касиетке ээ беш өсүмдүктөн (б.а. жалбыз, ыйык райхан, эвкалипт тактары, күкүрт жана мелалеука) негизги өсүмдүк EO кошулмаларынын натыйжалуу синергетикалык айкалыштарын аныктоого аракет кылынды.
Бардык тандалган EOлор Aedes aegyptiге каршы 24 сааттык LC50 0,42ден 163,65 ppmге чейин болгон потенциалдуу личинкалык активдүүлүктү көрсөтүштү. Эң жогорку личинкалык активдүүлүк жалбыз (Mp) EO үчүн катталган, LC50 мааниси 24 саатта 0,42 ppm, андан кийин сарымсак (As) үчүн 24 саатта LC50 мааниси 16,19 ppm болгон (1-таблица).
Ocimum Sainttum, Os EOдон тышкары, башка төрт текшерилген EOнун баары айкын аллергиялык таасирлерди көрсөттү, LC50 маанилери 24 сааттык таасир мезгилинде 23,37ден 120,16 ppmге чейин өзгөрдү. Thymophilus striata (Cl) EO таасирден кийин 24 сааттын ичинде LC50 мааниси 23,37 ppm болгон чоңдорду өлтүрүүдө эң натыйжалуу болду, андан кийин LC50 мааниси 101,91 ppm болгон Eucalyptus maculata (Em) келди (1-таблица). Башка жагынан алганда, Os үчүн LC50 мааниси азырынча аныктала элек, анткени эң жогорку дозада эң жогорку өлүм көрсөткүчү 53% катталган (3-кошумча сүрөт).
Ар бир EOдогу эки негизги курамдык кошулма NIST китепканасынын маалымат базасынын жыйынтыктарына, GC хроматограммасынын аянт пайызына жана MS спектрлеринин жыйынтыктарына негизделип аныкталып, тандалып алынган (2-таблица). EO As үчүн аныкталган негизги кошулмалар диалилдисульфид жана диалилтрисульфид болгон; EO Mp үчүн аныкталган негизги кошулмалар карвон жана лимонен, EO Em үчүн аныкталган негизги кошулмалар эудесмол жана эвкалиптол болгон; EO Os үчүн аныкталган негизги кошулмалар эвгенол жана метил эвгенол, ал эми EO Cl үчүн аныкталган негизги кошулмалар эвгенол жана α-пинен болгон (1-сүрөт, 5–8-кошумча сүрөттөр, 1–5-кошумча таблица).
Тандалган эфир майларынын негизги терпеноиддеринин массалык спектрометриясынын жыйынтыктары (А-диаллилдисульфиди; В-диаллил трисульфиди; С-эвгенол; D-метил эвгенол; Э-лимонен; F-ароматтык цеперон; G-α-пинен; Н-цинол; R-эвдамол).
Жалпысынан тогуз кошулма (диалил дисульфид, диалил трисульфид, эвгенол, метил эвгенол, карвон, лимонен, эвкалиптол, эвдесмол, α-пинен) EOнун негизги компоненттери болгон натыйжалуу кошулмалар катары аныкталып, личинка стадиясында Aedes aegyptiге каршы жекече биоанализден өткөрүлдү. Эудесмол кошулмасы 24 сааттык таасирден кийин LC50 мааниси 2,25 ppm болгон эң жогорку ларвициддик активдүүлүккө ээ болду. Диалил дисульфид жана диалил трисульфид кошулмалары да потенциалдуу ларвициддик таасирге ээ экени аныкталды, орточо сублеталдык дозалары 10–20 ppm диапазонунда. Евгенол, лимонен жана эвкалиптол кошулмалары үчүн LC50 маанилери 63,35 ppm, 139,29 ppm болгон орточо ларвициддик активдүүлүк кайрадан байкалды. жана 24 сааттан кийин тиешелүүлүгүнө жараша 181,33 ppm (3-таблица). Бирок, метил эвгенол менен карвондун эң жогорку дозаларда да ларвициддик потенциалы байкалган жок, ошондуктан LC50 маанилери эсептелген эмес (3-таблица). Синтетикалык ларвицид Temephos 24 сааттын ичинде Aedes aegyptiге каршы орточо өлүмгө алып келүүчү концентрациясы 0,43 ppm болгон (3-таблица, 6-кошумча таблица).
Натыйжалуу EOнун негизги кошулмалары катары жети кошулма (диалил дисульфиди, диалил трисульфиди, эвкалиптол, α-пинен, эвдесмол, лимонен жана карвон) аныкталып, чоңдорго таандык египеттик Aedes чиркейлерине каршы өз-өзүнчө текшерилген. Probit регрессиялык анализине ылайык, Эудесмолдун LC50 мааниси 1,82 ppm болгон эң жогорку потенциалы бар экени, андан кийин 24 сааттык экспозиция учурунда LC50 мааниси 17,60 ppm болгон Эвкалиптол келген. Сыналган калган беш кошулма LC50 мааниси 140,79дан 737,01 ppmге чейинки чоңдор үчүн орточо зыяндуу болгон (3-таблица). Синтетикалык органофосфор малатиону эудесмолго караганда анча күчтүү эмес жана башка алты кошулмага караганда жогору болгон, 24 сааттык экспозиция мезгилинде LC50 мааниси 5,44 ppm болгон (3-таблица, 6-кошумча таблица).
Алардын LC50 дозаларынын 1:1 катышындагы экилик айкалыштарын түзүү үчүн жети күчтүү коргошун кошулмасы жана органофосфор тамефосат тандалып алынган. Жалпысынан 28 экилик айкалыш даярдалып, алардын Aedes aegyptiге каршы ларвициддик эффективдүүлүгү текшерилген. Тогуз айкалыш синергетикалык, 14 айкалыш антагонисттик жана беш айкалыш ларвициддик эмес экени аныкталган. Синергетикалык айкалыштардын ичинен диалил дисульфид менен темофолдун айкалышы эң натыйжалуу болуп, 24 сааттан кийин 100% өлүм катталган (4-таблица). Ошо сыяктуу эле, лимонендин диалил дисульфид менен жана эвгенолдун тиметфос менен аралашмалары жакшы потенциалды көрсөттү, личинкалардын өлүмү 98,3%ды түздү (5-таблица). Калган 4 айкалыш, атап айтканда, эудесмол жана эвкалиптол, эудесмол жана лимонен, эвкалиптол жана альфа-пинен, альфа-пинен жана темофос, дагы ларвициддик эффективдүүлүктү көрсөттү, өлүм көрсөткүчү 90% дан ашты. Күтүлгөн өлүм көрсөткүчү 60-75% га жакын (4-таблица). Бирок, лимонендин α-пинен же эвкалипт менен айкалышы антагонисттик реакцияларды көрсөттү. Ошо сыяктуу эле, Темефостун эвгенол же эвкалипт же эудесмол же диалил трисульфид менен аралашмалары антагонисттик таасирге ээ экени аныкталган. Ошо сыяктуу эле, диалил дисульфид менен диалил трисульфиддин айкалышы жана бул кошулмалардын кайсынысынын болбосун эудесмол же эвгенол менен айкалышы ларвициддик таасири боюнча антагонисттик. Эудесмолдун эвгенол же α-пинен менен айкалышында да антагонизм жөнүндө кабарланган.
Чоңдордун кислоталык активдүүлүгү текшерилген бардык 28 экилик аралашманын ичинен 7 айкалышы синергетикалык, 6сы эч кандай таасир эткен эмес жана 15и антагонисттик болгон. Эвдесмолдун эвкалипт менен жана лимонендин карвон менен аралашмалары башка синергетикалык айкалыштарга караганда натыйжалуураак экени аныкталды, өлүм көрсөткүчү 24 саатта тиешелүүлүгүнө жараша 76% жана 100% түздү (5-таблица). Малатиондун лимонен менен диалил трисульфидден башка бардык кошулмалардын айкалыштары менен синергетикалык таасир көрсөтөрү байкалган. Башка жагынан алганда, диалил дисульфиди менен диалил трисульфиддин жана алардын экөөсүнүн эвкалипт, же эвкалиптол, же карвон, же лимонен менен айкалышынын ортосунда антагонизм табылган. Ошо сыяктуу эле, α-пинендин эудесмол же лимонен менен, эвкалиптолдун карвон же лимонен менен жана лимонендин эудесмол же малатион менен айкалыштары антагонисттик ларвициддик таасирлерди көрсөттү. Калган алты айкалыш үчүн күтүлгөн жана байкалган өлүмдүн ортосунда олуттуу айырмачылык болгон жок (5-таблица).
Синергетикалык таасирлерге жана сублеталдык дозаларга таянып, алардын көп сандагы Aedes aegypti чиркейлерине каршы ларвициддик уулуулугу акыры тандалып алынып, андан ары текшерилген. Жыйынтыктар көрсөткөндөй, эвгенол-лимонен, диалил дисульфид-лимонен жана диалил дисульфид-тимофос экилик айкалыштарын колдонуу менен байкалган личинкалардын өлүмү 100% түзгөн, ал эми күтүлгөн личинкалардын өлүмү тиешелүүлүгүнө жараша 76,48%, 72,16% жана 63,4% түзгөн (6-таблица). . Лимонен менен эудесмолдун айкалышы салыштырмалуу анча натыйжалуу болгон эмес, 24 сааттык таасир этүү мезгилинде 88% личинкалардын өлүмү байкалган (6-таблица). Кыскасы, тандалган төрт экилик айкалыш чоң масштабда колдонулганда Aedes aegyptiге каршы синергетикалык ларвициддик таасирлерди да көрсөттү (6-таблица).
Чоң Aedes aegypti популяцияларын көзөмөлдөө үчүн чоңдорго каршы биоанализ үчүн үч синергетикалык айкалыш тандалып алынган. Ири курт-кумурска колонияларында сыноо үчүн айкалыштарды тандоо үчүн, биз алгач эки эң мыкты синергетикалык терпен айкалыштарына, атап айтканда, карвон жана лимонен жана эвкалиптол жана эвдесмолго көңүл бурдук. Экинчиден, эң мыкты синергетикалык айкалыш синтетикалык органофосфат малатиону менен терпеноиддердин айкалышынан тандалып алынган. Биз малатион менен эвдесмолдун айкалышы эң жогорку өлүмгө жана талапкер ингредиенттердин LC50 маанилеринин өтө төмөндүгүнө байланыштуу ири курт-кумурска колонияларында сыноо үчүн эң жакшы айкалыш деп эсептейбиз. Малатион α-пинен, диалил дисульфиди, эвкалипт, карвон жана эвдесмол менен айкалышып синергизмди көрсөтөт. Бирок LC50 маанилерин карасак, Эудесмол эң төмөнкү мааниге ээ (2,25 ppm). Малатиондун, α-пинендин, диалил дисульфидинин, эвкалиптолдун жана карвондун эсептелген LC50 маанилери тиешелүүлүгүнө жараша 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 жана 140,79 ppm түзгөн. Бул маанилер малатион менен эудесмолдун айкалышы дозасы жагынан оптималдуу айкалыш экенин көрсөтүп турат. Жыйынтыктар көрсөткөндөй, карвон менен лимонендин жана эудесмол менен малатиондун айкалыштарында күтүлгөн өлүмгө салыштырмалуу 100% байкалган өлүмгө алып келген, ал эми күтүлгөн өлүмгө салыштырмалуу 61% дан 65% га чейин. Дагы бир айкалыш, эудесмол менен эвкалиптол, күтүлгөн өлүмгө салыштырмалуу 24 сааттык таасирден кийин өлүмгө алып келүү көрсөткүчү 78,66% түзгөн. Тандалган үч айкалыштын баары чоңдорго Aedes aegyptiге каршы кеңири масштабда колдонулганда да синергетикалык эффекттерди көрсөтүшкөн (6-таблица).
Бул изилдөөдө Mp, As, Os, Em жана Cl сыяктуу тандалган өсүмдүк EOлору Aedes aegypti личинкасынын жана жетилген стадияларына өлүмгө алып келүүчү келечектүү таасирлерди көрсөтүштү. Mp EO личинкага каршы эң жогорку активдүүлүккө ээ болуп, LC50 мааниси 0,42 ppm болгон, андан кийин As, Os жана Em EOлору 24 сааттан кийин LC50 мааниси 50 ppmден аз болгон. Бул жыйынтыктар чиркейлердин жана башка эки жүздүү чымындардын мурунку изилдөөлөрүнө дал келет10,11,12,13,14. Cl личинкага каршы потенциалы башка эфир майларына караганда төмөн болгону менен, 24 сааттан кийин LC50 мааниси 163,65 ppm болгону менен, анын жетилген потенциалы 24 сааттан кийин LC50 мааниси 23,37 ppm болгон эң жогорку көрсөткүчкө ээ. Mp, As жана Em EOлор да 24 сааттык таасирде LC50 маанилери менен 100–120 ppm диапазонунда жакшы аллергиялык потенциалды көрсөтүштү, бирок алардын личинкага каршы эффективдүүлүгүнө салыштырмалуу төмөн болду. Башка жагынан алганда, EO Os эң жогорку терапиялык дозада да анчалык деле аллергиялык таасир көрсөтпөгөн. Ошентип, жыйынтыктар этилен кычкылынын өсүмдүктөргө уулуулугу чиркейлердин өнүгүү этабына жараша өзгөрүшү мүмкүн экенин көрсөтүп турат15. Бул ошондой эле EOлордун курт-кумурскалардын денесине кирүү ылдамдыгына, алардын белгилүү бир максаттуу ферменттер менен өз ара аракеттенүүсүнө жана чиркейдин ар бир өнүгүү этабындагы детоксикациялоо жөндөмүнө жараша болот16. Көптөгөн изилдөөлөр негизги компонент кошулмасы этилен кычкылынын биологиялык активдүүлүгүндө маанилүү фактор экенин көрсөттү, анткени ал жалпы кошулмалардын көпчүлүгүн түзөт3,12,17,18. Ошондуктан, биз ар бир EOдо эки негизги кошулманы карап чыктык. GC-MS жыйынтыктарына таянып, диалил дисульфиди жана диалил трисульфиди EO Asтын негизги кошулмалары катары аныкталган, бул мурунку отчетторго дал келет19,20,21. Мурунку отчеттордо ментол анын негизги кошулмаларынын бири экени көрсөтүлгөнү менен, карвон жана лимонен кайрадан Mp EO22,23тын негизги кошулмалары катары аныкталган. Os EOнун курамынын профили эвгенол жана метил эвгенол негизги кошулмалар экенин көрсөттү, бул мурунку изилдөөчүлөрдүн жыйынтыктарына окшош16,24. Эвкалиптол жана эвкалиптол Эм жалбырагынын майындагы негизги кошулмалар катары кабарланган, бул кээ бир изилдөөчүлөрдүн жыйынтыктарына дал келет25,26, бирок Олаладе ж.б.нун жыйынтыктарына карама-каршы келет27. Цинеол жана α-пинендин үстөмдүгү мелалеука эфир майында байкалган, бул мурунку изилдөөлөргө окшош28,29. Бул изилдөөдө ар кайсы жерлерде бир эле өсүмдүк түрлөрүнөн алынган эфир майларынын курамындагы жана концентрациясындагы түр ичиндеги айырмачылыктар билдирилген жана байкалган, алар географиялык өсүмдүктөрдүн өсүү шарттарына, түшүм жыйноо убактысына, өнүгүү этабына же өсүмдүктүн жашына таасир этет. 22,30,31,32. Андан кийин аныкталган негизги кошулмалар сатылып алынып, алардын личинкага каршы таасири жана чоң Aedes aegypti чиркейлерине тийгизген таасири текшерилген. Жыйынтыктар диалил дисульфидинин личинкага каршы активдүүлүгү чийки EO As менен салыштырууга болорун көрсөттү. Бирок диалил трисульфидинин активдүүлүгү EO Asка караганда жогору. Бул жыйынтыктар Kimbaris et al. 33 тарабынан Culex philippines боюнча алынган жыйынтыктарга окшош. Бирок, бул эки кошулма максаттуу чиркейлерге каршы жакшы автоциддик активдүүлүктү көрсөткөн жок, бул Plata-Rueda et al. 34түн Tenebrio molitor боюнча жыйынтыктарына дал келет. Os EO Aedes aegypti личинка стадиясына каршы эффективдүү, бирок чоң стадиясына каршы эмес. Негизги жеке кошулмалардын личинкага каршы активдүүлүгү чийки Os EOго караганда төмөн экени аныкталган. Бул башка кошулмалардын жана алардын чийки этилен кычкылындагы өз ара аракеттенүүсүнүн ролун билдирет. Метил эвгенолдун өзү эле анча чоң эмес активдүүлүккө ээ, ал эми эвгенолдун өзү орточо личинкага каршы активдүүлүккө ээ. Бул тыянак бир жагынан тастыктайт,35,36, ал эми экинчи жагынан мурунку изилдөөчүлөрдүн тыянактарына карама-каршы келет,37,38. Эвгенол менен метилеугенолдун функционалдык топторундагы айырмачылыктар бир эле максаттуу курт-кумурскага ар кандай уулуу таасир этиши мүмкүн,39. Лимонен орточо личинкага каршы активдүүлүккө ээ экени аныкталган, ал эми карвондун таасири анча чоң эмес. Ошо сыяктуу эле, лимонендин чоң курт-кумурскаларга салыштырмалуу төмөн уулуулугу жана карвондун жогорку уулуулугу мурунку айрым изилдөөлөрдүн жыйынтыктарын колдойт,40, бирок башкаларына карама-каршы келет,41. Кош байланыштардын цикл ичиндеги жана экзоциклдик позицияларда болушу бул кошулмалардын ларвициддер катары пайдасын жогорулатышы мүмкүн3,41, ал эми каныкпаган альфа жана бета көмүртектери бар кетон болгон карвон чоңдордо уулуулугунун жогорку потенциалын көрсөтүшү мүмкүн42. Бирок, лимонен менен карвондун жеке мүнөздөмөлөрү жалпы EO Mpден бир топ төмөн (1-таблица, 3-таблица). Сыналган терпеноиддердин арасында эвдесмол LC50 мааниси 2,5 ppmден төмөн болгон ларвициддик жана чоңдорго каршы эң жогорку активдүүлүккө ээ экени аныкталды, бул аны Aedes чиркейлерин көзөмөлдөө үчүн келечектүү кошулмага айлантат. Анын көрсөткүчү бүтүндөй EO Emге караганда жакшыраак, бирок бул Ченг ж.б.40 изилдөөсүнүн жыйынтыктарына дал келбейт. Эвдесмол - бул эвкалипт сыяктуу кычкылтек менен байытылган монотерпендерге караганда аз учуучу жана ошондуктан пестицид катары чоң потенциалга ээ болгон эки изопрен бирдиги бар сесквитерпен. Эвкалиптолдун өзү личинкага караганда чоңдорго каршы активдүүлүккө ээ жана мурунку изилдөөлөрдүн жыйынтыктары муну колдойт жана жокко чыгарат37,43,44. Активдүүлүктүн өзү эле бүтүндөй EO Cl менен дээрлик салыштырууга болот. Дагы бир бициклдик монотерпен, α-пинен, Aedes aegyptiге чоңдорго каршы таасири азыраак, ал толук EO Cl таасирине карама-каршы келет. Терпеноиддердин жалпы инсектициддик активдүүлүгүнө алардын липофилдүүлүгү, туруксуздугу, көмүртектин бутактанышы, проекция аянты, беттик аянты, функционалдык топтору жана алардын позициялары таасир этет45,46. Бул кошулмалар клеткалардын топтолушун жок кылуу, дем алуу активдүүлүгүнө бөгөт коюу, нерв импульстарынын берилишин үзгүлтүккө учуратуу ж.б. менен таасир этиши мүмкүн.47 Синтетикалык органофосфат Темефос 0,43 ppm LC50 мааниси менен эң жогорку личинкага каршы активдүүлүккө ээ экени аныкталды, бул Лектин маалыматтарына дал келет - Utala48. Синтетикалык органофосфор малатионунун чоңдорго каршы активдүүлүгү 5,44 ppm деп кабарланган. Бул эки органофосфат Aedes aegypti лабораториялык штаммдарына каршы оң реакцияларды көрсөткөнү менен, дүйнөнүн ар кайсы бөлүктөрүндө чиркейлердин бул кошулмаларга туруктуулугу катталган49. Бирок, чөп дарыларына туруктуулуктун өнүгүшү жөнүндө окшош маалыматтар табылган жок50. Ошентип, ботаникалык заттар векторлорду көзөмөлдөө программаларында химиялык пестициддерге потенциалдуу альтернатива катары каралат.
Личинкага каршы таасири күчтүү терпеноиддерден жана тиметфос кошулган терпеноиддерден даярдалган 28 экилик айкалыштарда (1:1) сыналган, ал эми 9 айкалыш синергетикалык, 14 антагонисттик жана 5 антагонисттик экени аныкталган. Эч кандай таасири жок. Башка жагынан алганда, чоңдордун потенциалдык биоанализинде 7 айкалыш синергетикалык, 15 айкалыш антагонисттик жана 6 айкалыш эч кандай таасир этпегени кабарланган. Айрым айкалыштардын синергетикалык эффект беришинин себеби, талапкер кошулмалардын ар кандай маанилүү жолдордо бир убакта өз ара аракеттенишине же белгилүү бир биологиялык жолдун ар кандай негизги ферменттеринин ырааттуу ингибирленишине байланыштуу болушу мүмкүн51. Лимонендин диалил дисульфиди, эвкалипт же эвгенол менен айкалышы чакан жана ири масштабдуу колдонмолордо синергетикалык экени аныкталган (6-таблица), ал эми анын эвкалипт же α-пинен менен айкалышы личинкаларга антагонисттик таасир этет экени аныкталган. Орточо эсеп менен алганда, лимонен жакшы синергист болуп көрүнөт, балким, метил топторунун болушу, мүйүздүү катмарга жакшы кирүүсү жана башка таасир этүү механизми52,53. Буга чейин лимонен курт-кумурскалардын кутикулаларына кирүү (контакттык уулуулук), тамак сиңирүү системасына таасир этүү (антифидант) же дем алуу системасына таасир этүү (фумигациялык активдүүлүк) аркылуу уулуу таасирлерди жаратышы мүмкүн экени кабарланган, 54 ал эми эвгенол сыяктуу фенилпропаноиддер зат алмашуу ферменттерине таасир этиши мүмкүн 55. Ошондуктан, ар кандай таасир этүү механизмдери бар кошулмалардын айкалышы аралашманын жалпы өлүмгө алып келүүчү таасирин күчөтүшү мүмкүн. Эвкалиптол диалил дисульфиди, эвкалипт же α-пинен менен синергетикалык экени аныкталган, бирок башка кошулмалар менен башка айкалыштар ларвициддик эмес же антагонисттик болгон. Алгачкы изилдөөлөр эвкалиптолдун ацетилхолинэстеразага (AChE), ошондой эле октаамин жана ГАМК рецепторлоруна56 ингибирлөөчү активдүүлүгү бар экенин көрсөткөн. Циклдик монотерпендер, эвкалиптол, эвгенол ж.б. алардын нейротоксикалык активдүүлүгү менен бирдей таасир этүү механизмине ээ болушу мүмкүн болгондуктан, 57 ошону менен өз ара ингибирлөө аркылуу алардын айкалышкан таасирин минималдаштырат. Ошо сыяктуу эле, Темефостун диалил дисульфиди, α-пинен жана лимонен менен айкалышы синергетикалык экени аныкталды, бул чөптөрдөн жасалган продуктулар менен синтетикалык органофосфаттардын ортосундагы синергетикалык таасир жөнүндөгү мурунку билдирүүлөрдү тастыктайт58.
Эудесмол менен эвкалиптолдун айкалышы Aedes aegypti личинкалык жана бойго жеткен стадияларына синергетикалык таасир этээри аныкталган, бул алардын ар кандай химиялык түзүлүштөрүнөн улам ар кандай таасир этүү ыкмаларына байланыштуу болушу мүмкүн. Эудесмол (сесквитерпен) дем алуу системасына 59 таасир этиши мүмкүн, ал эми эвкалиптол (монотерпен) ацетилхолинэстеразага 60 таасир этиши мүмкүн. Ингредиенттердин эки же андан көп максаттуу жерлерге бирге таасир этиши айкалыштын жалпы өлүмгө алып келүүчү таасирин күчөтүшү мүмкүн. Чоңдордун зат биоанализдеринде малатион карвон же эвкалиптол же эвкалиптол же диалил дисульфид же α-пинен менен синергетикалык экени аныкталган, бул анын лимонен жана ди кошулганда синергетикалык экенин көрсөтөт. Аллил трисульфидден тышкары, терпен кошулмаларынын бүтүндөй портфели үчүн жакшы синергетикалык аллерцид талапкерлери. Thangam жана Kathiresan61 ошондой эле малатиондун чөп экстракттары менен синергетикалык таасиринин окшош натыйжаларын билдиришкен. Бул синергетикалык реакция малатиондун жана фитохимиялык заттардын курт-кумурскаларды детоксикациялоочу ферменттерге айкалышкан уулуу таасиринен улам келип чыгышы мүмкүн. Малатион сыяктуу органофосфаттар, адатта, цитохром P450 эстеразаларын жана монооксигеназаларын62,63,64 ингибирлөө менен иштейт. Ошондуктан, малатионду ушул таасир механизмдери менен жана терпендерди ар кандай таасир механизмдери менен айкалыштыруу чиркейлерге жалпы өлүмгө алып келүүчү таасирин күчөтүшү мүмкүн.
Башка жагынан алганда, антагонизм тандалган кошулмалардын айкалышында ар бир кошулманы өзүнчө алганда анча активдүү эместигин көрсөтөт. Айрым айкалыштардагы антагонизмдин себеби, бир кошулма сиңирүү, бөлүштүрүү, метаболизм же бөлүп чыгаруу ылдамдыгын өзгөртүү менен экинчи кошулманын жүрүм-турумун өзгөртүшү мүмкүн. Алгачкы изилдөөчүлөр муну дары айкалыштарындагы антагонизмдин себеби деп эсептешкен. Молекулалар Мүмкүн болгон механизм 65. Ошо сыяктуу эле, антагонизмдин мүмкүн болгон себептери окшош аракет механизмдерине, ошол эле рецептор же максаттуу сайт үчүн курамдык кошулмалардын атаандаштыгына байланыштуу болушу мүмкүн. Айрым учурларда, максаттуу белоктун атаандаштыксыз ингибирлениши да пайда болушу мүмкүн. Бул изилдөөдө эки органосульфур кошулмасы, диалил дисульфиди жана диалил трисульфиди, антагонисттик таасирлерди көрсөтүшкөн, балким, ошол эле максаттуу сайт үчүн атаандаштыктан улам. Ошо сыяктуу эле, бул эки күкүрт кошулмасы антагонисттик таасирлерди көрсөтүшкөн жана эудесмол жана α-пинен менен айкалышканда эч кандай таасир тийгизген эмес. Эудесмол жана альфа-пинен циклдик мүнөзгө ээ, ал эми диалил дисульфиди жана диалил трисульфиди алифаттык мүнөзгө ээ. Химиялык түзүлүшүнө таянып, бул кошулмалардын айкалышы жалпы өлүмгө алып келүүчү активдүүлүктү жогорулатышы керек, анткени алардын максаттуу жерлери адатта ар башка34,47, бирок эксперименталдык түрдө биз антагонизмди таптык, бул кээ бир белгисиз организмдердин in vivo системаларындагы өз ара аракеттенүүсүнүн натыйжасындагы ролуна байланыштуу болушу мүмкүн. Ошо сыяктуу эле, цинол менен α-пинендин айкалышы антагонисттик реакцияларды пайда кылды, бирок изилдөөчүлөр мурда эки кошулманын ар кандай аракет максаттары бар экенин билдиришкен47,60. Эки кошулма тең циклдик монотерпендер болгондуктан, байланышуу үчүн атаандашып, изилденген комбинатордук жуптардын жалпы уулуулугуна таасир этиши мүмкүн болгон кээ бир жалпы максаттуу жерлер болушу мүмкүн.
LC50 маанилерине жана байкалган өлүмгө негизделген эки эң мыкты синергетикалык терпен айкалышы тандалып алынган, атап айтканда, карвон + лимонен жана эвкалиптол + эудесмол жуптары, ошондой эле терпендер менен синтетикалык органофосфор малятиону. Малатион + Эудесмол кошулмаларынын оптималдуу синергетикалык айкалышы чоңдордун инсектицид биоанализинде сыналган. Бул натыйжалуу айкалыштар салыштырмалуу чоң экспозиция мейкиндиктеринде көп сандагы особдорго каршы иштей алабы же жокпу, ырастоо үчүн ири курт-кумурска колонияларын бутага алыңыз. Бул айкалыштардын баары курт-кумурскалардын чоң үйүрлөрүнө каршы синергетикалык таасир көрсөтөт. Aedes aegypti личинкаларынын чоң популяцияларына каршы сыналган оптималдуу синергетикалык личинкага каршы айкалыш үчүн окшош натыйжалар алынган. Ошентип, өсүмдүктүн EO кошулмаларынын натыйжалуу синергетикалык личинкага каршы жана чоңдорго каршы айкалышы бар синтетикалык химиялык заттарга каршы күчтүү талапкер болуп саналат жана андан ары Aedes aegypti популяцияларын көзөмөлдөө үчүн колдонулушу мүмкүн деп айтууга болот. Ошо сыяктуу эле, синтетикалык ларвициддердин же чоңдорго каршы каражаттардын терпендер менен натыйжалуу айкалыштары чиркейлерге берилүүчү тиметфостун же малатиондун дозаларын азайтуу үчүн да колдонулушу мүмкүн. Бул күчтүү синергетикалык айкалыштар Aedes чиркейлериндеги дарыга туруктуулуктун эволюциясы боюнча келечектеги изилдөөлөр үчүн чечимдерди камсыз кылышы мүмкүн.
Aedes aegypti жумурткалары Индиянын медициналык изилдөөлөр кеңешинин Дибругархтагы аймактык медициналык изилдөө борборунан чогултулуп, Гаухати университетинин Зоология бөлүмүндө төмөнкү шарттарда көзөмөлдөнгөн температурада (28 ± 1 °C) жана нымдуулукта (85 ± 5%) кармалган: Ариволи ж.б. сүрөттөлгөн. Жумурткадан чыккандан кийин, личинкаларга личинка тоюту (ит печеньесинин порошогу жана ачыткы 3:1 катышында), ал эми чоңдорго 10% глюкоза эритмеси берилген. Чыгарылгандан кийинки 3-күндөн баштап, чоң ургаачы чиркейлерге альбинос келемиштердин канын соруу мүмкүнчүлүгү берилген. Фильтр кагазын стакандагы сууга чылап, жумуртка тууй турган капаска салыңыз.
Тандалган өсүмдүк үлгүлөрү, атап айтканда, эвкалипт жалбырактары (Myrtaceae), ыйык райхан (Lamiaceae), жалбыз (Lamiaceae), мелалеука (Myrtaceae) жана аллий пиязчалары (Amaryllidaceae). Гувахатиден чогултулуп, Гаухати университетинин ботаника бөлүмү тарабынан аныкталган. Чогултулган өсүмдүк үлгүлөрү (500 г) 6 саат бою Clevenger аппаратын колдонуп гидродистилляцияга дуушар болгон. Алынган EO таза айнек флакондорго чогултулуп, андан ары изилдөө үчүн 4°C температурада сакталган.
Личинкага каршы уулуулугу бир аз өзгөртүлгөн стандарттык Дүйнөлүк саламаттыкты сактоо уюмунун процедураларын колдонуу менен изилденген 67. Эмульгатор катары DMSO колдонуңуз. Ар бир EO концентрациясы алгач 100 жана 1000 ppm концентрациясында текшерилип, ар бир кайталоодо 20 личинка ачыкка чыгарылган. Жыйынтыктардын негизинде концентрация диапазону колдонулуп, өлүм 1 сааттан 6 саатка чейин (1 сааттык аралыкта) жана дарылоодон кийин 24, 48 жана 72 саатта катталган. Сублеталдык концентрациялар (LC50) 24, 48 жана 72 сааттык таасирден кийин аныкталган. Ар бир концентрация үч жолу кайталанып, бир терс контрол (суу гана) жана бир оң контрол (DMSO менен тазаланган суу) менен бирге изилденген. Эгерде куурчакча пайда болуп, контролдук топтун личинкаларынын 10% дан ашыгы өлсө, эксперимент кайталанат. Эгерде контролдук топтогу өлүм көрсөткүчү 5-10% ортосунда болсо, Эбботттун коррекциялык формуласын колдонуңуз 68.
Рамар жана башкалар тарабынан сүрөттөлгөн ыкма эриткич катары ацетонду колдонуу менен чоңдордун Aedes aegypti чиркейлерине каршы биоанализ үчүн колдонулган. Ар бир EO алгач 100 жана 1000 ppm концентрацияларында чоңдордун Aedes aegypti чиркейлерине каршы текшерилген. Ар бир даярдалган эритмеден 2 мл Ватман санына сүйкөңүз. 1 даана чыпка кагазын (өлчөмү 12 x 15 см2) алып, ацетонду 10 мүнөт буулантыңыз. Контролдук катары 2 мл ацетон менен гана иштетилген чыпка кагазы колдонулган. Ацетон буулангандан кийин, иштетилген чыпка кагазы жана контролдук чыпка кагазы цилиндр формасындагы түтүккө (тереңдиги 10 см) салынат. Кан менен азыктанбаган 3-4 күндүк он чиркей ар бир концентрациянын үч нускасына которулган. Алдын ала сыноолордун жыйынтыктарынын негизинде тандалган майлардын ар кандай концентрациялары текшерилген. Өлүм чиркейлер чыккандан кийин 1 саат, 2 саат, 3 саат, 4 саат, 5 саат, 6 саат, 24 саат, 48 саат жана 72 сааттан кийин катталган. LC50 маанилерин 24 саат, 48 саат жана 72 сааттын таасир этүү убактысы үчүн эсептеңиз. Эгерде контролдук партиянын өлүм көрсөткүчү 20% ашса, бүтүндөй тестти кайталаңыз. Ошо сыяктуу эле, эгерде контролдук тобундагы өлүм көрсөткүчү 5% дан жогору болсо, иштетилген үлгүлөрдүн жыйынтыктарын Эбботтун формуласын колдонуп тууралаңыз68.
Тандалган эфир майларынын курамдык кошулмаларын талдоо үчүн газ хроматографиясы (Agilent 7890A) жана массалык спектрометрия (Accu TOF GCv, Jeol) жүргүзүлдү. GC FID детектору жана капиллярдык колонка (HP5-MS) менен жабдылган. Алып жүрүүчү газ гелий болгон, агым ылдамдыгы 1 мл/мин болгон. GC программасы Allium sativumду 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M жана Ocimum Sainttumду 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, жалбыз үчүн 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, эвкалипт үчүн 20.60-1M-10-200-3M-30-280 жана кызыл үчүн 10 деп коёт. Миң катмар үчүн алар 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Ар бир EOнун негизги кошулмалары GC хроматограммасынан жана массалык спектрометриянын жыйынтыктарынан эсептелген аянттын пайызына негизделип аныкталган (NIST 70 стандарттар базасына шилтеме берилген).
Ар бир ЭОдогу эки негизги кошулма GC-MS жыйынтыктарынын негизинде тандалып алынган жана андан аркы биоанализдер үчүн Sigma-Aldrich компаниясынан 98–99% тазалыкта сатылып алынган. Кошулмалар жогоруда сүрөттөлгөндөй, Aedes aegyptiге каршы ларвициддик жана чоңдор үчүн эффективдүүлүккө текшерилген. Эң көп колдонулган синтетикалык ларвициддер тамефосат (Sigma Aldrich) жана чоңдор үчүн малатион дарысынын (Sigma Aldrich) эффективдүүлүгүн ошол эле процедураны аткаруу менен тандалган ЭО кошулмалары менен салыштыруу үчүн талданган.
Тандалган терпен кошулмаларынын жана терпен кошулмаларынын, ошондой эле коммерциялык органофосфаттардын (тилефос жана малатион) экилик аралашмалары ар бир талапкер кошулманын LC50 дозасын 1:1 катышында аралаштыруу менен даярдалган. Даярдалган айкалыштар жогоруда сүрөттөлгөндөй Aedes aegypti личинка жана жетилген баскычтарында сыналган. Ар бир биоанализ ар бир айкалыш үчүн үч жолу жана ар бир айкалыштагы жеке кошулмалар үчүн үч жолу жүргүзүлдү. Максаттуу курт-кумурскалардын өлүмү 24 сааттан кийин катталган. Экилик аралашма үчүн күтүлгөн өлүм көрсөткүчүн төмөнкү формуланы колдонуп эсептеңиз.
мында E = Aedes aegypti чиркейлеринин экилик айкалышка, башкача айтканда, байланышка (A + B) жооп катары күтүлгөн өлүм көрсөткүчү.
Ар бир бинардык аралашманын таасири Pavla52 тарабынан сүрөттөлгөн ыкма менен эсептелген χ2 маанисине негизделген синергетикалык, антагонисттик же эч кандай таасир этпеген деп белгиленген. Төмөнкү формуланы колдонуп, ар бир айкалыш үчүн χ2 маанисин эсептеңиз.
Айкалыштыруунун таасири, эсептелген χ2 мааниси тиешелүү эркиндик даражалары үчүн таблица маанисинен (95% ишеним аралыгы) чоң болгондо жана байкалган өлүм күтүлгөн өлүмдөн ашып кеткенде синергетикалык деп аныкталган. Ошо сыяктуу эле, эгерде кандайдыр бир айкалыш үчүн эсептелген χ2 мааниси кандайдыр бир эркиндик даражалары бар таблица маанисинен ашып кетсе, бирок байкалган өлүм күтүлгөн өлүмдөн төмөн болсо, дарылоо антагонисттик деп эсептелет. Ал эми кандайдыр бир айкалышта χ2 эсептелген мааниси тиешелүү эркиндик даражаларындагы таблица маанисинен аз болсо, айкалыш эч кандай таасир этпейт деп эсептелет.
Көп сандагы курт-кумурскаларга каршы сыноо үчүн үчтөн төрткө чейинки потенциалдуу синергетикалык айкалыштар (100 личинка жана 50 личинкага каршы жана чоң курт-кумурскаларга каршы активдүүлүк) тандалып алынган. Чоңдор) жогорудагыдай эле аракет кылышат. Аралашмалар менен бирге, тандалган аралашмалардагы жеке кошулмалар да бирдей сандагы Aedes aegypti личинкаларында жана чоңдорунда текшерилген. Айкалыштыруу катышы бир талапкер кошулманын бир бөлүгү LC50 дозасына жана башка курамдык кошулманын бир бөлүгү LC50 дозасына барабар. Чоңдордун активдүүлүгүнүн биоанализинде тандалган кошулмалар эриткич ацетондо эритилип, 1300 см3 цилиндр формасындагы пластик идишке оролгон чыпка кагазына колдонулган. Ацетон 10 мүнөт бууланып, чоңдору бошотулган. Ошо сыяктуу эле, личинкага каршы биоанализде LC50 талапкер кошулмаларынын дозалары алгач бирдей көлөмдөгү DMSOдо эритилип, андан кийин 1300 см3 пластик идиштерде сакталган 1 литр суу менен аралаштырылган жана личинкалар бошотулган.
LC50 маанилерин эсептөө үчүн SPSS (16-версия) жана Minitab программалык камсыздоосун колдонуу менен 71 катталган өлүм маалыматтарынын ыктымалдуулук талдоосу жүргүзүлдү.
Жарыяланган убактысы: 2024-жылдын 1-июлу