Карагай нематоду карагай токоюнун экосистемаларында олуттуу экономикалык жоготууларга алып келген карантиндик миграциялык эндопаразит болуп саналат. Бул изилдөө карагайдын нематоддоруна каршы галогендик индолдордун нематициддик активдүүлүгүн жана алардын аракет механизмин карап чыгат. 5-iodoindole жана avermectin (оң контролдоо) карагайдын нематоддоруна каршы нематициддик активдүүлүгү окшош жана төмөн концентрацияда (10 мкг/мл) жогору болгон. 5-иодоиндол уруктуулукту, репродуктивдүү активдүүлүктү, эмбриондук жана личинкалардын өлүмүн жана кыймыл-аракетти азайткан. омурткасыз өзгөчө глутамат-дарбаза хлорид канал кабылдагычтар менен лиганддардын молекулярдык өз ара аракеттенүү 5-iodoindole, avermectin сыяктуу эле, кабылдагыч активдүү сайты менен тыгыз байланышта деген түшүнүктү колдойт. 5-Iodoindole ошондой эле нематоддордо ар кандай фенотиптик деформацияларды, анын ичинде органдын анормалдуу кыйрашы/кичирейүүсү жана вакуолизациянын көбөйүшүнө алып келген. Бул жыйынтыктар вакуолдор нематоддун метилизациясы аркылуу өлүмгө алып келүүсүндө роль ойношу мүмкүн экенин көрсөтүп турат. Маанилүүсү, 5-iodoindole эки өсүмдүк түрлөрүнө (капуста жана чамгыр) уулуу эмес болгон. Ошентип, бул изилдөө экологиялык шарттарда йодоиндолду колдонуу карагайдын куурап калышына зыян келтире аларын көрсөтүп турат.
Карагайдын нематоду (Bursaphelenchus xylophilus) карагай жыгачынын нематоддарына (PWN) кирет, карагай токойунун экосистемасына катуу экологиялык зыян келтириши белгилүү болгон миграциялык эндопаразит нематоддор1. Карагай жыгачынын нематодунан келип чыккан карагайдын куусу оорусу (PWD) бир нече континенттерде, анын ичинде Азияда жана Европада олуттуу көйгөйгө айланууда, ал эми Түндүк Америкада нематод карагайдын интродукцияланган түрлөрүн жок кылат1,2. Карагай дарактарынын азайышы негизги экономикалык көйгөй болуп саналат жана анын глобалдык жайылуу келечеги тынчсыздандырат3. Нематоддор көбүнчө карагайлардын төмөнкү түрлөрүнө чабуул коюшат: Pinus densiflora, Pinus sylvestris, Pinus thunbergii, Pinus koraiensis, Pinus thunbergii, Pinus thunbergii жана Pinus radiata4. Карагай нематоду карагайларды инфекциядан бир нече жума же айлар ичинде өлтүрө турган олуттуу оору. Мындан тышкары, карагайдын нематоддорунун очогу ар кандай экосистемаларда кеңири таралган, ошондуктан туруктуу инфекция чынжырлары түзүлдү1.
Bursaphelenchus xylophilus - Aphelenchoidea супер тукумуна жана 102.5 классына таандык карантиндик өсүмдүк-мите нематод. Нематод козу карындар менен азыктанат жана карагайлардын жыгач кыртыштарында көбөйүп, төрт түрдүү личинка стадиясына өтөт: L1, L2, L3, L4 жана бойго жеткен индивид1,6. Азык-түлүк жетишсиздигинин шартында карагайдын нематоду адистештирилген личинка стадиясына – дауэрге өтөт, ал өзүнүн таратуучусу – карагайдын кабыгынын коңузуна (Monochamus alternatus) мителик кылып, дени сак карагайга өтөт. Дени сак кожоюндарда нематоддор өсүмдүк ткандары аркылуу тез миграцияланып, паренхиматоздук клеткалар менен азыктанат, бул инфекциядан кийин бир жылдын ичинде бир катар өтө сезгичтик реакцияларына, карагайдын солуп кетишине жана өлүмгө алып келет1,7,8.
Карагайдын нематоддору менен биологиялык күрөш көптөн бери кыйын болуп келген, карантин чаралары 20-кылымдан бери башталган. Карагайдын нематоддоруна каршы күрөшүүнүн учурдагы стратегиялары биринчи кезекте химиялык тазалоону, анын ичинде жыгачты фумигациялоону жана нематициддерди дарактын сөңгөгүнө имплантациялоону камтыйт. Көбүнчө колдонулган нематициддер avermectin үй-бүлөсүнө таандык авермектин жана авермектин бензоат болуп саналат. Бул кымбат химиялык заттар нематоддордун көптөгөн түрлөрүнө каршы өтө эффективдүү жана экологиялык жактан коопсуз деп эсептелет9. Бирок, бул нематициддерди кайра-кайра колдонуу селекциялык басымды жаратышы күтүлөт, бул дээрлик туруштуу карагай нематоддорунун пайда болушуна алып келет, бул Leptinotarsa decemlineata, Plutella xylostella жана Trichostrongylus colubriformis жана Ostertacintagia циркуляциялык туруктуулукка ээ болгон бир нече курт-кумурскалар үчүн көрсөткөндөй. avermectins10,11,12. Ошондуктан, PVD менен күрөшүү үчүн альтернативалуу, экономикалык жактан үнөмдүү жана экологиялык жактан таза чараларды табуу үчүн туруктуулуктун схемаларын үзгүлтүксүз изилдеп, нематициддерди тынымсыз текшерип туруу керек. Акыркы он жылдыктарда бир катар авторлор нематоддорго каршы агенттер катары өсүмдүк экстрактыларын, эфир майларын жана учуучу заттарды колдонууну сунушташкан13,14,15,16.
Биз жакында Caenorhabditis elegans 17 менен индол, клеткалар аралык жана interkingdom сигналдык молекуланын нематициддик ишин көрсөттү. Индол микробдук экологияда кеңири таралган клетка ичиндеги сигнал болуп саналат, микробдук физиологияга, споралардын пайда болушуна, плазмиддердин туруктуулугуна, дары-дармектерге туруштук берүүгө, биофильмдин пайда болушуна жана вируленттүүлүккө 18, 19 таасир этүүчү көптөгөн функцияларды көзөмөлдөйт. Индолдун жана анын туундуларынын башка патогендик нематоддорго каршы активдүүлүгү изилденген эмес. Бул изилдөөдө биз карагайдын нематоддоруна каршы 34 индолдун нематициддик активдүүлүгүн изилдедик жана микроскопия, убакыттын өтүшү менен фотосүрөткө тартуу жана молекулярдык док эксперименттерин колдонуу менен эң күчтүү 5-иодоиндолдун иш-аракет механизмин ачып бердик жана анын өсүмдүктөргө уулуу таасирине баа бердик.
Индолдун жогорку концентрациясы (> 1,0 мМ) мурда нематоддорго17 нематициддик таасири бар экени кабарланган. B. xylophilus (аралаш жашоо стадиялары) индол же 33 түрдүү индол туундулары менен 1 мМ менен дарылоодон кийин, B. xylophilus өлүмү контролдоочу жана дарыланган топтордогу тирүү жана өлгөн нематоддорду эсептөө менен өлчөнгөн. Беш индол олуттуу нематициддик активдүүлүктү көрсөттү; тазаланбаган контролдоо тобунун жашоосу 24 сааттан кийин 95 ± 7% болгон. Сыналган 34 индолдун ичинен 1 мМде 5-иодоиндол жана 4-фториндол 100% өлүмгө алып келген, ал эми 5,6-дифториндиго, метилиндол-7-карбоксилат жана 7-йодиндол болжол менен 50% өлүмгө алып келген (1-таблица).
Карагай жыгачынын нематодунун вакуолдун пайда болушуна жана метаболизмине 5-иодоиндолдун таасири. (A) Авермектиндин жана 5-йодиндолдун бойго жеткен эркек нематоддорго тийгизген таасири, (B) L1 стадиядагы нематоддордун жумурткалары жана (C) B. xylophilus метаболизми, (i) вакуолдор 0 саатта байкалган эмес, дарылоонун натыйжасында (ii) вакуолдор, (iii) вакуолдор, (iii) вакуолдор, вакуолдор көп топтолгон вакуольдардын биригиши жана (vi) гигант вакуольдордун пайда болушу. Кызыл жебелер вакуольдордун шишип кеткенин, көк жебелер вакуольдордун биригүүсүн, ал эми кара жебелер гиганттык вакуольдорду көрсөтөт. Масштаб тилкеси = 50 мкм.
Мындан тышкары, бул изилдөө ошондой эле карагайдын нематоддорунун метандан улам өлүмүнүн ырааттуу процессин сүрөттөгөн (Figure 4C). Метаногендик өлүм - бул көрүнүктүү цитоплазмалык вакуолдордун топтолушу менен байланышкан апоптотикалык эмес клетка өлүмү. Карагай нематоддорунда байкалган морфологиялык кемчиликтер метандын өлүмүнүн механизми менен тыгыз байланышта. Ар кандай мезгилдеги микроскопиялык изилдөө 5-иодоиндолдун (0,1 мМ) таасиринен 20 саат өткөндөн кийин гиганттык вакуолдор пайда болгонун көрсөттү. Микроскопиялык вакуольдер 8 саат дарылоодон кийин байкалып, 12 сааттан кийин алардын саны көбөйгөн. 14 сааттан кийин бир нече чоң вакуоль байкалган. Бир нече бириккен вакуолдор 12-16 саат дарылоодон кийин ачык көрүнүп турду, бул вакуолдун синтези метаногендик өлүм механизминин негизи экенин көрсөтүп турат. 20 сааттан кийин курт боюнча бир нече гигант вакуоль табылган. Бул байкоолор C. elegans метуозунун биринчи отчетун билдирет.
5-йодиндол менен дарыланган курттарда вакуолдун агрегациясы жана жарылуусу да байкалды (5-сүрөт), бул курттун ийилиши жана айлана-чөйрөгө вакуолдун чыгышы менен далилденген. Вакуольдун бузулушу жумуртканын кабыгынын кабыкчасында да байкалган, ал адатта инкубация учурунда L2 тарабынан бүтүн бойдон сакталат (кошумча S2 сүрөт). Бул байкоолор суюктуктун топтолушунун жана осморегуляциянын бузулушунун, ошондой эле реверсивдүү клетка жаракатынын (RCI) вакуолдун пайда болушу жана ириңдөө процессине катышуусун колдойт (5-сүрөт).
Байкалып жаткан вакуолдун пайда болушунда йоддун ролун гипотеза кылып, натрий йодидинин (NaI) жана калий йодидинин (КИ) нематициддик активдүүлүгүн изилдедик. Бирок, концентрацияларда (0,1, 0,5 же 1 мМ), алар нематоддордун жашоосуна да, вакуолдун пайда болушуна да таасир эткен эмес (Кошумча S5 сүрөт), бирок 1 мм KI бир аз нематициддик таасирге ээ болгон. Башка жагынан алганда, 7-йодоиндол (1 же 2 мМ), 5-иодоиндол сыяктуу, бир нече вакуолдорду жана структуралык деформацияларды пайда кылган (Кошумча S6 сүрөт). Эки йодоиндол карагайдын нематоддорунда окшош фенотиптик мүнөздөмөлөрдү көрсөттү, ал эми NaI жана KI андай эмес. Кызыгы, индол сыноодон өткөн концентрацияларда B. xylophilusда вакуолдун пайда болушуна түрткү берген эмес (маалыматтар көрсөтүлгөн эмес). Ошентип, натыйжалар индол-йод комплекси B. xylophilus вакуолизациясы жана метаболизми үчүн жооптуу экендигин тастыктады.
Нематициддик активдүүлүк үчүн сыналган индолдордун арасында 5-иодиндол эң жогорку тайгалануу индексине ээ болгон -5,89 ккал/моль, андан кийин 7-иодоиндол (-4,48 ккал/моль), 4-фториндол (-4,33) жана индол (-4,03) (сүрөт 6). 5-йодиндолдун лейцин 218 менен күчтүү магистралдык суутек байланышы анын байланышын турукташтырат, ал эми башка бардык индол туундулары каптал чынжыр суутек байланыштары аркылуу серин 260 менен байланышат. Башка моделдештирилген iodoindoles арасында, 2-iodoindole лейцин 218 менен негизги суутек байланыш менен шартталган -5,248 ккал/моль, милдеттүү мааниге ээ. Башка белгилүү байланыштар 3-iodoindole (-4,3 ккал/моль), 4-iodoindole (-4,0 ккал/моль) кирет (-4,0 ккал/молу. ккал/моль) (кошумча S8 сүрөт). Көпчүлүк галогендүү индолдор жана индолдун өзү, 5-йодиндол жана 2-йодиндолду кошпогондо, серин 260 менен байланыш түзүшөт. Лейкин 218 менен суутек байланышы ивермектин үчүн байкалгандай эффективдүү рецептор-лиганд байланышынын көрсөткүчү болуп саналат (Кошумча Fig-iodoindos) жана муну тастыктайт. 2-iodoindole, ivermectin сыяктуу, лейцин 218 (сүрөт. 6 жана Кошумча Fig. S8) аркылуу GluCL кабылдагычтын активдүү сайты менен тыгыз байланышта. Биз бул байланыш GluCL комплексинин ачык тешикче түзүмүн сактап калуу үчүн талап кылынат жана GluCL рецепторунун активдүү сайтына, 5-иодоиндол, 2-иодоиндол, авермектин жана ивермектин менен тыгыз байланышып, ион каналын ачык кармап, суюктукту кабыл алууга мүмкүндүк берет деп сунуштайбыз.
GluCL үчүн индолдун жана галогендүү индолдун молекулярдык туташтыруу. GluCL активдүү сайтына (A) indole, (B) 4-fluoroindole, (C) 7-iodoindole жана (D) 5-iodoindole ligands милдеттүү багыттары. Протеин лента менен, ал эми магистралдык суутек байланыштары сары чекиттүү сызыктар менен көрсөтүлгөн. (A'), (B'), (C') жана (D') тиешелүү лиганддардын курчап турган аминокислота калдыктары менен өз ара аракеттенүүсүн көрсөтүп, каптал чынжырлуу суутек байланыштары кызгылт чекиттүү жебелер менен көрсөтүлгөн.
Капустанын жана чамгырдын уруктарынын өнүп чыгышына 5-иодоиндолдун уулуу таасирин баалоо боюнча эксперименттер өткөрүлдү. 5-йодоиндол (0,05 же 0,1 мм) же авермектин (10 мкг/мл) алгачкы өнүп чыгууга жана өсүмдүктүн чыгышына аз же такыр таасир эткен эмес (7-сүрөт). Мындан тышкары, эч кандай олуттуу айырмачылык 5-iodoindole же avermectin менен дарыланбаган контролдоо жана уруктардын өнүү ылдамдыгы табылган. 5-иодоиндолдун 1 мМ (анын активдүү концентрациясынан 10 эсе көп) каптал тамырлардын өнүгүшүн бир аз кечеңдеткени менен тамырдын узундугуна жана пайда болгон каптал тамырларынын санына таасири анча деле чоң эмес. Бул жыйынтыктар 5-иодиндол өсүмдүк клеткалары үчүн уулуу эмес экенин жана изилденген концентрацияларда өсүмдүктүн өнүгүү процесстерине тоскоол эмес экенин көрсөтүп турат.
5-иодоиндолдун уруктун өнүп чыгышына тийгизген таасири. Мурашиге жана Скоог агар чөйрөсүндө B. oleracea жана R. raphanistrum уруктарынын өнүп чыгышы, өсүп чыгышы жана капталдан тамырлашы авермектин же 5-иодоиндол менен же жок. Өнүү 22°С 3 күн инкубациялоодон кийин катталган.
Бул изилдөө индолдор менен нематоддорду өлтүргөн бир нече учурларды билдирет. Маанилүү нерсе, бул карагай ийнелериндеги йодоиндолдун метилдениши (кичинекей вакуолдордун топтолушу менен шартталган процесс, алар бара-бара гигант вакуолдорго кошулуп, акыры мембрананын жарылуусуна жана өлүмүнө алып келет) иодиндолдун коммерциялык нематициддик касиеттерге окшош биринчи отчету.
Буга чейин индолдор прокариоттордо жана эукариоттордо бир нече сигналдык функцияларды аткара тургандыгы, анын ичинде биоплёнканы бөгөт коюу/түзүү, бактериялардын жашоосу жана патогендүүлүгү19,32,33,34. Жакында галогендүү индолдордун, индол алкалоиддеринин жана жарым синтетикалык индолдун туундуларынын потенциалдуу терапиялык таасирлери кеңири изилдөө кызыгуусун жаратты35,36,37. Мисалы, галогендүү индолдор туруктуу ичеги таякчасын жана алтын стафилококк клеткаларын өлтүрөт37. Мындан тышкары, галогендүү индолдордун башка түрлөргө, тукумдарга жана падышалыктарга каршы эффективдүүлүгүн изилдөө илимий кызыгууну жаратат жана бул изилдөө бул максатка жетүү үчүн жасалган кадам болуп саналат.
Бул жерде, биз C. elegans менен 5-iodoindole-индукция өлүмгө үчүн механизмин сунуш кылынган кайра клетка жаракат (RCI) жана methylation (Figure 4C жана 5). Шишик жана вакуолдук дегенерация сыяктуу шишиктүү өзгөрүүлөр цитоплазмада гиганттык вакуолдор катары көрүнгөн RCI жана метилизациянын көрсөткүчү болуп саналат48,49. RCI ATP өндүрүшүн азайтып, ATPase насосунун иштен чыгышына же клетка мембранасынын бузулушуна жана Na+, Ca2+ жана суунун тез агып чыгышына жолтоо болуп, энергия өндүрүшүнө тоскоолдук кылат50,51,52. Жаныбар клеткаларында интрацитоплазмадагы вакуолдор Са2+ менен суунун агымынан улам цитоплазмада суюктуктун топтолушу натыйжасында пайда болот53. Кызыгы, эгер зыян убактылуу болсо жана клеткалар белгилүү бир убакытка чейин АТФ өндүрө баштаса, клетканын бузулушунун бул механизми кайра кайтарылат, бирок бузулуу улана берсе же начарлай берсе, клеткалар өлөт.54 Биздин байкоолорубуз көрсөткөндөй, 5-йодиндол менен дарыланган нематоддор стресстик шарттарга дуушар болгондон кийин кадимки биосинтезди калыбына келтире алышпайт.
B. xylophilusдагы 5-иодоиндол тарабынан индукцияланган метилдештирүү фенотиби йоддун болушуна жана анын молекулярдык бөлүштүрүлүшүнө байланыштуу болушу мүмкүн, анткени 7-иодоиндол B. xylophilusга 5-иодоиндолго караганда азыраак ингибитордук таасирге ээ болгон (1-таблица жана S6 кошумча сүрөт). Бул жыйынтыктар Maltese et al. изилдөөлөр менен жарым-жартылай дал келет. (2014), индолдогу пиридил азот бөлүгүн пара-позициядан мета-позицияга көчүрүү U251 клеткаларында вакуолизацияны, өсүүнү токтотууну жана цитотоксикацияны жокко чыгарды деп билдирди, бул молекуланын протеиндин белгилүү бир активдүү жери менен өз ара аракеттенүүсү маанилүү27,44,45. Бул изилдөөдө байкалган индол же галогендүү индолдор менен GluCL рецепторлорунун ортосундагы өз ара аракеттешүү да бул түшүнүктү колдойт, анткени 5 жана 2-йодиндол GluCL рецепторлору менен текшерилген башка индолдарга караганда күчтүүрөөк байланышат (6-сүрөт жана кошумча сүрөт S8). Индолдун экинчи же бешинчи позициясындагы йод GluCL рецепторунун лейцин 218 менен магистралдык суутек байланыштары аркылуу байланышат, ал эми башка галогендүү индолдор жана индолдун өзү серин 260 менен алсыз каптал чынжырлуу суутек байланыштарын түзүшөт (6-сүрөт). Ошондуктан галогендин локализациясы вакуолярдык дегенерациянын индукциясында маанилүү ролду ойнойт, ал эми 5-йодиндолдун тыгыз байланышы ион каналын ачык кармап, ошону менен суюктуктун тез агылышына жана вакуолдун жарылып кетишине жол ачат деп ойлойбуз. Бирок, 5-iodoindole иш-аракетинин майда-чүйдөсүнө чейин механизми аныкталышы керек.
5-йодиндолду практикалык колдонуудан мурун анын өсүмдүктөргө уулуу таасирин талдоо керек. Биздин үрөндөрдүн өнүп чыгышы боюнча эксперименттерибиз 5-иодидолдун изилденген концентрацияларда уруктун өнүп чыгышына же андан кийинки өнүгүү процесстерине терс таасирин тийгизбегендигин көрсөттү (7-сүрөт). Ошентип, бул изилдөө карагайдын нематоддорунун карагайга болгон зыяндуулугун көзөмөлдөө үчүн экологиялык чөйрөдө 5-иодоиндолду колдонууга негиз түзөт.
Буга чейинки отчеттор индолдун негизиндеги терапия антибиотиктерге туруктуулук жана рактын прогресси55 көйгөйүн чечүү үчүн потенциалдуу ыкма экенин көрсөттү. Мындан тышкары, индолдор антибактериалдык, ракка каршы, антиоксиданттык, сезгенүүгө каршы, диабетке каршы, вируска каршы, пролиферативдик жана кургак учукка каршы активдүүлүккө ээ жана дары-дармекти иштеп чыгуу үчүн келечектүү негиз боло алат56,57. Бул изилдөө биринчи жолу йодду антипаразиттик жана антигельминттик агент катары колдонууну сунуш кылат.
Авермектин мындан отуз жыл мурун ачылып, 2015-жылы Нобель сыйлыгын алган жана аны антигельминтик катары колдонуу дагы эле активдүү уланууда. Бирок, нематоддордо жана курт-кумурскалардын зыянкечтеринин авермектиндерге туруктуулугунун тез өнүгүшүнө байланыштуу, карагайлардагы PWN инфекциясын көзөмөлдөө үчүн альтернативалуу, арзан жана экологиялык жактан таза стратегия керек. Бул изилдөө ошондой эле 5-iodoindole карагайдын нематоддорун өлтүргөн механизмин жана 5-иодиндолдун өсүмдүк клеткаларына аз уулуулугун көрсөтөт, бул анын келечектеги коммерциялык колдонуу үчүн жакшы перспективаларды ачат.
Бардык эксперименттер Кореянын Кёнсан шаарындагы Йунгнам университетинин этика комитети тарабынан жактырылган жана методдор Юнгнам университетинин этика комитетинин көрсөтмөлөрүнө ылайык аткарылган.
Жумуртканы инкубациялоо боюнча эксперименттер белгиленген процедураларды колдонуу менен жүргүзүлдү43. Инкубациянын ылдамдыгын (HR) баалоо үчүн 1 күндүк бойго жеткен нематоддор (болжол менен 100 ургаачы жана 100 эркек) кычыткы бар Петри табактарына көчүрүлүп, 24 саат бою өсүүгө уруксат берилди. Андан кийин жумурткалар изоляцияланган жана стерилдүү дистилденген сууда суспензия катары 5-иодоиндол (0,05 мМ жана 0,1 мм) же авермектин (10 мкг/мл) менен дарыланган. Бул суспензиялар (500 мкл; болжол менен 100 жумуртка) 24 көзөнөктүү кыртыш культурасы пластинкасынын скважиналарына өткөрүлүп берилди жана 22 °Cде инкубацияланды. L2 саны инкубациядан 24 саат өткөндөн кийин жасалды, бирок клеткалар жакшы платина зым менен стимулдаганда кыймылдабаса, өлүк деп эсептелинет. Бул эксперимент эки этапта, ар бири алты кайталоо менен өткөрүлдү. Эки эксперименттин маалыматтары бириктирилген жана берилген. HR пайызы төмөнкүдөй эсептелет:
Личинкалардын өлүмү мурда иштелип чыккан процедураларды колдонуу менен бааланган. Нематоддордун жумурткалары чогултулуп, эмбриондор L2 стадиясындагы личинкаларды түзүү үчүн стерилдүү дистилденген сууда инкубациялоо жолу менен синхрондоштурулган. Синхрондуу личинкалар (болжол менен 500 нематод) 5-иодоиндол (0,05 мМ жана 0,1 мМ) же авермектин (10 мкг/мл) менен дарыланып, B. cinerea Петри пластинкаларында өстүрүлгөн. 22 °Cде 48 саат инкубациялоодон кийин нематоддор стерилдүү дистилденген сууга чогултулуп, L2, L3 жана L4 баскычтарынын бар-жоктугун текшеришти. L3 жана L4 стадияларынын болушу личинкалардын трансформациясын көрсөтсө, L2 стадиясынын болушу трансформациянын жоктугун көрсөттү. Сүрөттөр iRiS™ Digital Cell Imaging System аркылуу алынган. Бул эксперимент эки этапта, ар бири алты кайталоо менен өткөрүлдү. Эки эксперименттин маалыматтары бириктирилген жана берилген.
5-иодоиндолдун жана авермектиндин уруктарга уулуулугу Мурашиге жана Ског агар пластинкаларында өнүү сыноолорунун жардамы менен бааланган.62 B. oleracea жана R.raphanistrum уруктары адегенде стерилдүү дистилденген сууга бир күн чылап, 1 мл 100% соода этанол менен жууп, стерилденген 1 мл 100% этанол менен жуушту. гипохлорит) 15 мин жана беш жолу 1 мл стерилдүү суу менен жуушат. Андан кийин стерилденген уруктар 0,86 г/л (0,2X) Мурашиге жана Ског чөйрөсүн жана 5-иодоиндол же авермектин бар же жок 0,7% бактериологиялык агарды камтыган өнүү агары пластинкаларына басылды. Андан кийин плиталар 22 °C температурада инкубацияланган жана 3 күн инкубациядан кийин сүрөттөр алынган. Бул эксперимент эки этапта жүргүзүлүп, алардын ар бири алты жолу кайталанган.
Посттун убактысы: 26-февраль 2025-жыл