Синтетикалык пестициддерди кеңири колдонуу көптөгөн көйгөйлөргө, анын ичинде туруктуу организмдердин пайда болушуна, экологиянын бузулушуна жана адамдын ден соолугуна зыян келтирүүгө алып келди.Ошондуктан адамдын ден соолугуна жана айлана-чөйрөгө коопсуз жаңы микробдук пестициддер тез арада керек.Бул изилдөөдө Enterobacter cloacae SJ2 тарабынан өндүрүлгөн рамнолипид биосурфактанты чиркейдин (Culex quinquefasciatus) жана термиттин (Odontotermes obesus) личинкаларынын уулуулугун баалоо үчүн колдонулган.Натыйжалар дарылоонун ортосунда дозага көз каранды өлүм көрсөткүчү бар экенин көрсөттү.Термиттердин жана чиркейлердин личинкаларынын биосурфактанттары үчүн 48 саатта LC50 (50% өлүмгө дуушар болгон концентрация) мааниси сызыктуу эмес регрессия ийри сызыгын орнотуу ыкмасы менен аныкталган.Натыйжалар биосурфактанттын ларвициддик жана антитермиттик активдүүлүгүнүн 48 сааттык LC50 маанилери (95% ишеним аралыгы) 26,49 мг/л (25,40-27,57 диапазон) жана 33,43 мг/л (31,09-35,68 диапазон) экендигин көрсөттү.Гистологиялык изилдөөнүн жыйынтыгы боюнча биосурфактант менен дарылоо личинкалардын жана термиттердин органеллдеринин ткандарына катуу зыян келтирген.Бул изилдөөнүн натыйжалары Enterobacter cloacae SJ2 тарабынан өндүрүлгөн микробдук биосурфактант Cx контролдоо үчүн эң сонун жана потенциалдуу натыйжалуу курал экенин көрсөтүп турат.quinquefasciatus жана O. obesus.
Тропикалык өлкөлөрдө чиркейлер аркылуу жуккан оорулардын саны көп1.Чиркейлер аркылуу жуккан оорулардын актуалдуулугу кеңири таралган.Жыл сайын безгектен 400 000ден ашык адам өлөт, кээ бир ири шаарларда денге, сары безгек, чикунгунья жана Зика сыяктуу олуттуу оорулардын эпидемиялары байкалууда.2 Вектор аркылуу жуккан оорулар дүйнө жүзү боюнча ар бир алтынчы инфекция менен байланышкан, алардын көбүн чиркейлер алып келет. маанилүү учурлар3 ,4.Culex, Anopheles жана Aedes чиркейлердин үч тукуму, көбүнчө оорунун жугушу менен байланышкан5.Денге ысытмасынын таралышы, Aedes aegypti чиркейи аркылуу жугуучу инфекция, акыркы он жылда көбөйүп, коомдук ден соолук үчүн олуттуу коркунуч туудурат4,7,8.Бүткүл дүйнөлүк саламаттыкты сактоо уюмунун (ДСУ) маалыматы боюнча, дүйнө калкынын 40%дан ашыгы денге ысытмасынын коркунучу алдында турат, жыл сайын 100дөн ашык өлкөдө 50-100 миллион жаңы учурлар катталат9,10,11.Денге ысытмасы дүйнө жүзү боюнча көбөйгөндүктөн, саламаттыкты сактоонун негизги көйгөйүнө айланды12,13,14.Anopheles gambiae, адатта, африкалык Anopheles чиркейи катары белгилүү, тропикалык жана субтропиктик аймактарда адам безгегинин эң маанилүү вектору болуп саналат15.Батыш Нил вирусу, Сент-Луис энцефалит, жапон энцефалити жана жылкылардын жана канаттуулардын вирустук инфекциялары көбүнчө үй чиркейлери деп аталган Culex чиркейлери аркылуу жугат.Мындан тышкары, алар бактериялык жана мите ооруларды алып жүрүүчүлөр болуп саналат16.Дүйнөдө термиттердин 3000ден ашык түрү бар жана алар 150 миллион жылдан ашык убакыттан бери жашап келет17.Көпчүлүк зыянкечтер кыртышта жашап, курамында целлюлоза бар жыгач жана жыгач буюмдары менен азыктанышат.Индиялык термит Odontotermes obesus маанилүү айыл чарба өсүмдүктөрүнө жана плантация дарактарына олуттуу зыян келтирүүчү маанилүү зыянкеч болуп саналат18.Дыйканчылык аймактарында ар кандай этаптарда термиттердин жугушу ар кандай айыл чарба өсүмдүктөрүнө, дарак түрлөрүнө жана курулуш материалдарына чоң экономикалык зыян келтириши мүмкүн.Термиттер адамдын ден соолугуна да зыян келтириши мүмкүн19.
Азыркы фармацевтика жана айыл чарба талааларында микроорганизмдерге жана зыянкечтерге туруктуулук маселеси татаал20,21.Ошондуктан, эки компания тең жаңы үнөмдүү микробго каршы каражаттарды жана коопсуз биопестициддерди издеши керек.Синтетикалык пестициддер азыр бар жана алар жугуштуу жана максаттуу эмес пайдалуу курт-кумурскаларды кууп чыгара тургандыгы далилденген22.Акыркы жылдарда биосурфактанттарды изилдөө алардын ар кандай тармактарда колдонулушуна байланыштуу кеңейди.Биосурфактанттар айыл чарбасында, жер кыртышын рекультивациялоодо, мунай өндүрүүдө, бактерияларды жана курт-кумурскаларды жок кылууда жана тамак-аш өндүрүшүндө өтө пайдалуу жана өтө маанилүү23,24.Биосурфактант же микробдук беттик активдүү заттар жээктеги жашоо чөйрөлөрүндө жана мунай менен булганган аймактарда бактериялар, ачыткылар жана козу карындар сыяктуу микроорганизмдер тарабынан өндүрүлгөн биосурфактант химиялык заттар болуп саналат25,26.Химиялык жол менен алынган беттик активдүү заттар жана биосурфактанттар табигый чөйрөдөн түздөн-түз алынган эки түрү болуп саналат27.Ар кандай биосурфактанттар деңиз жашоочу жайларынан алынат28,29.Ошондуктан окумуштуулар табигый бактериялардын негизинде биосурфактанттарды өндүрүүнүн жаңы технологияларын издеп жатышат30,31.Мындай изилдөөлөрдөгү жетишкендиктер айлана-чөйрөнү коргоо үчүн бул биологиялык кошулмалардын маанилүүлүгүн көрсөтөт32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium жана бул бактерия тукумдары жакшы изилденген өкүлдөрү болуп саналат23,33.
Колдонуу чөйрөсү кеңири болгон биосурфактанттардын көптөгөн түрлөрү бар34.Бул кошулмалардын олуттуу артыкчылыгы, алардын кээ бирлери антибактериалдык, ларвициддик жана инсектициддик активдүүлүккө ээ.Бул аларды айыл чарба, химия, фармацевтика жана косметикалык тармактарда колдонсо болот35,36,37,38 дегенди билдирет.Биосирфактанттар жалпысынан биологиялык жактан бузулуучу жана экологиялык жактан пайдалуу болгондуктан, алар өсүмдүктөрдү коргоо үчүн зыянкечтерге каршы комплекстүү программаларда колдонулат39.Ошентип, Enterobacter cloacae SJ2 тарабынан өндүрүлгөн микробдук биосурфактанттардын ларвициддик жана антитермиттик активдүүлүгү жөнүндө негизги билимдер алынды.Биз rhamnolipid biosurfactants ар кандай концентрациясына дуушар болгондо өлүм жана гистологиялык өзгөрүүлөрдү карап чыктык.Мындан тышкары, биз микробалырлар, дафниялар жана балыктар үчүн курч уулуулугун аныктоо үчүн кеңири колдонулган Quantitative Structure-Activity (QSAR) Ecological Structure-Activity (ECOSAR) компьютердик программасын бааладык.
Бул изилдөөдө 30дан 50 мг/млге чейин (5 мг/мл аралыкта) ар кандай концентрацияларда тазаланган биосурфактанттардын антитермиттик активдүүлүгү (уулуулугу) индиялык термиттерге, O. obesus жана төртүнчү түргө каршы сыналган.Instar Cx личинкалары.Чиркейлердин личинкалары quinquefasciatus.Biosurfactant LC50 концентрациясы 48 сааттын ичинде O. obesus жана Cx каршы.C. solanacearum.Чиркейлердин личинкалары сызыктуу эмес регрессия ийри сызыгын орнотуу ыкмасы менен аныкталган.Натыйжалар термиттердин өлүмү биосурфактанттын концентрациясынын жогорулашы менен көбөйгөнүн көрсөттү.Натыйжалар биосурфактант ларвициддик активдүүлүккө (1-сүрөт) жана термиттерге каршы активдүүлүккө (2-сүрөт) ээ экенин көрсөттү, 48 сааттык LC50 мааниси (95% CI) 26,49 мг/л (25,40дан 27,57ге чейин) жана 33,43 мг/ l (31.09-35.68-сүрөт), тиешелүүлүгүнө жараша (1-таблица).Курч уулануу (48 саат) боюнча биосурфактант текшерилген организмдер үчүн "зыяндуу" катары классификацияланат.Бул изилдөөдө өндүрүлгөн биосурфактант 24-48 сааттын ичинде 100% өлүм менен мыкты ларвициддик активдүүлүктү көрсөттү.
Ларвциддик активдүүлүк үчүн LC50 маанисин эсептеңиз.Сызыктуу эмес регрессия ийри сызыгы (катуу сызык) жана салыштырмалуу өлүмдүн 95% ишеним аралыгы (көлөкөлүү аймак) (%).
Термитке каршы активдүүлүк үчүн LC50 маанисин эсептеңиз.Сызыктуу эмес регрессия ийри сызыгы (катуу сызык) жана салыштырмалуу өлүмдүн 95% ишеним аралыгы (көлөкөлүү аймак) (%).
Эксперименттин аягында микроскоптун астында морфологиялык өзгөрүүлөр жана аномалиялар байкалды.Морфологиялык өзгөрүүлөр 40x чоңойтууда контролдук жана дарыланган топтордо байкалган.3-сүрөттө көрсөтүлгөндөй, биосурфактант менен дарыланган личинкалардын көпчүлүгүндө өсүү бузулушу байкалган.Сүрөт 3a кадимки Cx көрсөтөт.quinquefasciatus, 3b-сүрөттө аномалдуу Cx көрсөтүлгөн.Беш нематод личинкасын пайда кылат.
Culex quinquefasciatus личинкаларынын өнүгүшүнө биосурфактанттардын сублеталдык (LC50) дозаларынын таасири.Жарык микроскопиялык сүрөт (а) 40 × чоңойтуудагы кадимки Cx.quinquefasciatus (б) анормалдуу Cx.Беш нематод личинкасын пайда кылат.
Бул изилдөөдө дарыланган личинкаларды (4-сүрөт) жана термиттерди (5-сүрөт) гистологиялык изилдөөдө бир нече аномалиялар, анын ичинде ичтин аянтынын кыскарышы жана булчуңдардын, эпителий катмарларынын жана теринин бузулушу аныкталган.орто ичеги.Гистология бул изилдөөдө колдонулган биосурфактанттын ингибитордук активдүүлүгүнүн механизмин ачып берди.
Кадимки тазаланбаган 4-кадам Cx личинкаларынын гистопатологиясы.quinquefasciatus личинкалары (контролдоо: (a,b)) жана биосурфактант менен дарыланган (дарылоо: (c,d)).Жебелер иштетилген ичеги эпителийин (epi), ядрону (n) жана булчуңду (mu) көрсөтөт.Бар = 50 мкм.
Кадимки тазаланбаган O. obesus гистопатологиясы (контролдоо: (a,b)) жана биосурфактант дарыланган (дарылоо: (c,d)).Жебелер ичеги эпителийин (эпи) жана булчуңду (mu) көрсөтөт.Бар = 50 мкм.
Бул изилдөөдө ECOSAR рамнолипид биосурфактант продуктуларынын курч уулуулугун баштапкы өндүрүүчүлөргө (жашыл балырлар), баштапкы керектөөчүлөргө (суу бүргөлөрү) жана экинчилик керектөөчүлөргө (балык) алдын ала айтуу үчүн колдонулган.Бул программа молекулярдык түзүлүшкө негизделген уулуулукту баалоо үчүн татаал сандык структура-активдүүлүк кошулма моделдерин колдонот.Модель суу түрлөрүнө заттардын курч жана узак мөөнөттүү уулуулугун эсептөө үчүн структуралык активдүүлүк (SAR) программасын колдонот.Тактап айтканда, 2-таблицада бир нече түр үчүн болжолдуу өлүмгө дуушар болгон орточо концентрациялар (LC50) жана орточо эффективдүү концентрациялар (EC50) жалпыланган.Химиялык заттарды классификациялоонун жана маркировкалоонун глобалдык гармонизацияланган тутумунун (3-таблица) колдонуу менен шектүү уулуулугу төрт деңгээлге бөлүнгөн.
Векторлор аркылуу жуккан ооруларга, өзгөчө чиркейлердин жана Aedes чиркейлеринин штаммдарына каршы күрөшүү.Египеттиктер, азыр кыйын иш 40,41,42,43,44,45,46.Пиретроиддер жана органофосфаттар сыяктуу химиялык жактан жеткиликтүү кээ бир пестициддер кандайдыр бир деңгээлде пайдалуу болгону менен, адамдын ден соолугуна, анын ичинде диабетке, репродуктивдүү ооруларга, неврологиялык ооруларга, рак жана респиратордук ооруларга олуттуу коркунуч келтирет.Мындан тышкары, убакыттын өтүшү менен бул курт-кумурскалар аларга туруштук бере алышат13,43,48.Ошентип, натыйжалуу жана экологиялык жактан таза биологиялык күрөш чаралары чиркейлерге каршы күрөштүн популярдуу ыкмасы болуп калат49,50.Бенелли51 чиркейлердин таратуучуларын эрте контролдоо шаар жеринде натыйжалуураак болот деп сунуштады, бирок алар айыл жеринде ларвициддерди колдонууну сунушташкан жок52.Том ж.б. 53 ошондой эле чиркейлерди жетиле элек стадияларында көзөмөлдөө коопсуз жана жөнөкөй стратегия болорун, анткени алар контролдоочу агенттерге 54 сезимтал экенин айтышкан.
Күчтүү штамм (Enterobacter cloacae SJ2) менен биосурфактантты өндүрүү ырааттуу жана келечектүү натыйжалуулукту көрсөттү.Биздин мурунку изилдөөбүз Enterobacter cloacae SJ2 физика-химиялык параметрлерди колдонуу менен биосурфактант өндүрүшүн оптималдаштырат деп билдирди.Алардын изилдөөсүнө ылайык, потенциалдуу E. cloacae изоляты менен биосурфактантты өндүрүү үчүн оптималдуу шарттар 36 саат инкубациялоо, 150 айн/мин, рН 7,5, 37 °C, туздуулук 1 ppt, көмүртек булагы катары 2% глюкоза, 1% ачыткы болгон. .экстракты 2,61 г/л биосурфактантты алуу үчүн азот булагы катары колдонулган.Мындан тышкары, биосурфактанттар TLC, FTIR жана MALDI-TOF-MS аркылуу мүнөздөлгөн.Бул рамнолипид биосурфактант экенин тастыктады.Гликолипиддик биосурфактанттар биосурфактанттардын башка түрлөрүнүн эң интенсивдүү изилденген классы болуп саналат55.Алар карбонгидрат жана липиддик бөлүктөрдөн, негизинен май кислоталарынын чынжырларынан турат.Гликолипиддердин ичинен негизги өкүлдөрү рамнолипид жана софоролипиддер56.Рамнолипиддердин курамында моно- же ди-β-гидроксидеканой кислотасы 57 менен байланышкан эки рамноза бөлүгү бар.Медицина жана фармацевтика өнөр жайларында рамнолипиддерди колдонуу жакшы жолго коюлган 58, мындан тышкары, пестициддер катары акыркы колдонулган 59.
Биосүрфактанттын дем алуу сифонунун гидрофобдук аймагы менен өз ара аракеттенүүсү суунун анын стоматалык көңдөйү аркылуу өтүшүнө мүмкүндүк берет, ошону менен личинкалардын суу чөйрөсү менен байланышын жогорулатат.Биосирфактанттардын болушу трахеяга да таасирин тийгизет, анын узундугу жер бетине жакын, бул личинкалардын жер бетине сойлоп, дем алуусун жеңилдетет.Натыйжада суунун беттик чыңалуусу төмөндөйт.Личинкалар суунун бетине жабышып кете албагандыктан, алар резервуардын түбүнө түшүп, гидростатикалык басымды бузуп, ашыкча энергия сарпташат жана чөгүп өлүшөт38,60.Окшош жыйынтыктар Ghribi61 тарабынан алынган, анда Bacillus subtilis тарабынан өндүрүлгөн биосурфактант Ephestia kuehniellaга каршы ларвициддик активдүүлүктү көрсөткөн.Ошо сыяктуу эле, Cx ларвициддик активдүүлүгү.Das жана Mukherjee23 ошондой эле quinquefasciatus личинкаларына циклдик липопептиддердин таасирин баалашты.
Бул изилдөөнүн натыйжалары Cx каршы рамнолипид биосурфактанттардын ларвициддик активдүүлүгүнө тиешелүү.Quinquefasciatus чиркейлерин өлтүрүү мурда жарыяланган жыйынтыктарга дал келет.Мисалы, Bacillus тукумундагы ар кандай бактериялар тарабынан өндүрүлгөн surfactin негизиндеги биосурфактанттар колдонулат.жана Pseudomonas spp.Кээ бир алгачкы отчеттор64,65,66 Bacillus subtilis23 липопептид биосурфактанттарынын личинкаларды өлтүрүүчү активдүүлүгүн билдирди.Дипали жана башкалар.63 Stenotropomonas maltophiliaдан бөлүнүп алынган rhamnolipid biosurfactant 10 мг/л концентрациясында күчтүү ларвициддик активдүүлүккө ээ экенин аныкташкан.Silva жана башкалар.67 1 г/л концентрациясында rhamnolipid biosurfactant Ae каршы larvicidal ишин билдирди.Aedes aegypti.Канакданде жана башкалар.68 Bacillus subtilis тарабынан өндүрүлгөн липопептид биосурфактанттары Culex личинкаларында жана эвкалипттин липофилдүү бөлүкчөсүндөгү термиттерде жалпы өлүмгө алып келгенин билдирди.Ошо сыяктуу эле, Masendra et al.69 жумушчу кумурска (Cryptotermes cynocephalus Light.) E. чийки экстракты lipophilic n -hexane жана EtOAc бөлчөк 61,7% өлүмүн билдирди.
Parthipan et al 70 Bacillus subtilis A1 жана Pseudomonas stutzeri NA3 тарабынан өндүрүлгөн липопептиддик биосурфактанттарды Anopheles Stephensi, безгек мите плазмодиумунун векторуна каршы инсектициддик колдонууну билдирди.Алар личинкалар менен куурчактардын узак жашай турганын, жумурткалоо мезгили кыска экенин, стерилдүү болгондугун жана биосурфактанттардын ар кандай концентрациясы менен дарыланганда өмүрүнүн узактыгын байкашкан.B. subtilis биосурфактанты A1 байкалган LC50 маанилери ар кандай личинкалар үчүн 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 жана 7,99 мг/л болгон (б.а. личинкалар I, II, III, IV жана стадиядагы куурчактар).Салыштыруу үчүн, Pseudomonas stutzeri NA3 личинкасынын I-IV баскычтары жана куурчак баскычтары үчүн биосурфактант тиешелүүлүгүнө жараша 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 жана 6,99 мг/л болгон.Тирүү калган личинкалардын жана куурчактардын кечиктирилген фенологиясы инсектициддер менен дарылоодон келип чыккан олуттуу физиологиялык жана зат алмашуунун бузулушунун натыйжасы деп эсептелет71.
Wickerhamomyces anomalus штамы CCMA 0358 Aedes чиркейлерине каршы 100% ларвициддик активдүүлүгү бар биосурфактантты чыгарат.aegypti 24 сааттык интервал 38 Silva et al.Көмүртек булагы катары күн карама майын колдонуу менен Pseudomonas aeruginosaдан өндүрүлгөн биосурфактант 48 сааттын ичинде личинкалардын 100% 67 өлтүрөт.Abinaya et al.72 жана Pradhan et al.73 ошондой эле Bacillus тукумунун бир нече изоляты тарабынан өндүрүлгөн беттик активдүү заттардын ларвициддик же инсектициддик таасирин көрсөткөн.Сентил-Натан жана башкалар тарабынан мурда жарыяланган изилдөө.өсүмдүктөрдүн лагуналарына дуушар болгон чиркей личинкаларынын 100% өлүшү мүмкүн экенин аныкташкан.74.
Инсектициддердин курт-кумурскалардын биологиясына өлүмгө дуушар кылуучу таасирин баалоо зыянкечтерге каршы комплекстүү башкаруу программалары үчүн абдан маанилүү, анткени сублеталдык дозалар/концентрациялар курт-кумурскаларды өлтүрбөйт, бирок биологиялык мүнөздөмөлөрдү бузуп, келечектеги муундарда курт-кумурскалардын популяциясын азайтышы мүмкүн10.Siqueira et al 75 rhamnolipid biosurfactant толук larvicidal иш (100% өлүмү) байкалган (300 мг / мл) 50 300 мг / мл чейин ар кандай концентрациясында сыноодон.Aedes aegypti штаммдарынын личинка стадиясы.Алар өлүмгө чейинки убакыттын жана сублеталдык концентрациялардын личинкалардын жашоосуна жана сүзүү активдүүлүгүнө тийгизген таасирин талдоого алышкан.Мындан тышкары, алар биосурфактанттын сублеталдык концентрациясынын (мисалы, 50 мг/мл жана 100 мг/мл) таасири 24-48 сааттан кийин сүзүү ылдамдыгынын төмөндөшүн байкашкан.Сублеталдык ролу бар уулар зыянкечтерге көп зыян келтирүүдө натыйжалуураак деп эсептелинет76.
Биздин натыйжалардын гистологиялык байкоолору Enterobacter cloacae SJ2 тарабынан өндүрүлгөн биосурфактанттар чиркейдин (Cx. quinquefasciatus) жана термиттин (O. obesus) личинкаларынын ткандарын олуттуу түрдө өзгөртөрүн көрсөтүп турат.Ушундай эле аномалиялар Ан.gambiaes.s жана Ан.arabica Ochola77 тарабынан сүрөттөлгөн.Kamaraj et al.78 да ошол эле морфологиялык аномалияларды сүрөттөп Ан.Стефанинин личинкаларына алтын нанобөлүкчөлөрү дуушар болгон.Vasantha-Srinivasan et al.79 ошондой эле койчунун капчыгы эфир майы Aedes albopictusтун камерасын жана эпителий катмарын катуу жабыркаганын билдирди.Aedes aegypti.Raghavendran et al чиркей личинкалары жергиликтүү Penicillium козу карындын 500 мг / мл мицелия экстракты менен дарыланган деп билдирди.Ae оор гистологиялык зыян көрсөтөт.aegypti жана Cx.Өлүмдүн деңгээли 80. Мурда Abinaya et al.Андын төртүнчү жаштагы личинкалары изилденген.Stephensi жана Ae.aegypti B. licheniformis экзополисахариддери менен дарыланган Aedes aegyptiде көптөгөн гистологиялык өзгөрүүлөрдү тапкан, анын ичинде ашказандагы сокур ичеги, булчуңдардын атрофиясы, нерв жиптеринин ганглияларынын бузулушу жана бузулушу72.Raghavendran ж.Ушундай эле гистологиялык өзгөрүүлөр эхинацея жалбырагынын экстракты менен дарыланган чиркей личинкаларында байкалган, бул дарыланган кошулмалардын инсектициддик потенциалын көрсөтүп турат50.
ECOSAR программалык камсыздоосун колдонуу эл аралык деңгээлде таанылды82.Учурдагы изилдөөлөр көрсөткөндөй, ECOSAR биосурфактанттарынын микробалырларга (C. vulgaris), балыктарга жана суу бүргөлөрүнө (D. magna) курч уулуулугу Бириккен Улуттар Уюму тарабынан аныкталган “уулуулугу” категориясына кирет83.ECOSAR экотоксикалык модели заттардын курч жана узак мөөнөттүү уулуулугун болжолдоо үчүн SAR жана QSARды колдонот жана көбүнчө органикалык булгоочу заттардын уулуулугун болжолдоо үчүн колдонулат82,84.
Параформальдегид, натрий фосфат буфери (рН 7.4) жана бул изилдөөдө колдонулган бардык башка химиялык заттар HiMedia лабораторияларынан, Индиядан сатылып алынган.
Биосирфактантты өндүрүү жалгыз көмүртек булагы катары 1% чийки мунай кошулган 200 мл стерилдүү Bushnell Haas чөйрөсүн камтыган 500 мл Эрленмейер колбаларында жүргүзүлдү.Enterobacter cloacae SJ2 прекультурасы (1,4 × 104 CFU/мл) 7 күн бою 37°C, 200 айн/минуттагы орбиталдык чайкагычта себилди жана өстүрүлдү.Инкубациялык мезгилден кийин биосурфактант маданий чөйрөнү 3400×g 20 мүнөт 4°C центрифугалоо жолу менен экстракцияланган жана алынган супернатант скрининг максаттары үчүн колдонулган.Биосирфактанттарды оптималдаштыруу процедуралары жана мүнөздөмөлөрү биздин мурунку изилдөөбүздөн кабыл алынган26.
Culex quinquefasciatus личинкалары Деңиз биологиясы боюнча тереңдетилген изилдөө борборунан (CAS), Паланчипетайдан, Тамил Надудан (Индия) алынган.Личинкалар 27 ± 2°C деионизацияланган суу менен толтурулган пластик идиштерде жана 12:12 фотопериоддо (жарык: караңгы) өстүрүлгөн.Чиркейлердин личинкалары 10% глюкоза эритмеси менен азыктандырылды.
Ачык жана корголбогон септиктерден Culex quinquefasciatus личинкалары табылган.Личинкаларды лабораторияда культивациялоо жана аныктоо үчүн стандарттуу классификациялык көрсөтмөлөрдү колдонуңуз85.Ларвициддик сыноолор Бүткүл дүйнөлүк саламаттыкты сактоо уюмунун 86 сунуштарына ылайык жүргүзүлгөн.Ш.Quinquefasciatus дын төртүнчү жаштагы личинкалары 25 мл жана 50 мл топтордо жабык түтүкчөлөргө алардын сыйымдуулугунун үчтөн эки бөлүгүн түзгөн аба боштугу менен чогултулган.Биосурфактант (0-50 мг/мл) ар бир түтүккө өзүнчө кошулуп, 25 °C температурада сакталган.Башкаруу түтүкчөсүндө дистилденген суу гана колдонулган (50 мл).Өлгөн личинкалар инкубациялык мезгилде (12–48 саат) 87 сүзүү белгилерин көрсөтпөгөндөр деп эсептелген.Теңдеме аркылуу личинкалардын өлүмүнүн пайызын эсептегиле.(1)88.
Odontotermitidae үй-бүлөсүнө айыл чарба кампусунда (Аннамалай университети, Индия) чириген бадалдардан табылган индиялык термит Odontotermes obesus кирет.Бул биосурфактантты (0–50 мг/мл) анын зыяндуу экенин аныктоо үчүн кадимки процедураларды колдонуп текшериңиз.Ламинардык аба агымында 30 мүнөт кургатылгандан кийин ватман кагазынын ар бир тилкеси 30, 40 же 50 мг/мл концентрациясында биосурфактант менен капталган.Алдын ала капталган жана капталбаган кагаз тилкелери Петри табактын борборунда сыналып, салыштырылган.Ар бир Петри табагында отузга жакын активдүү термит O. obesus бар.Контролдук жана сыноочу термиттерге азык булагы катары нымдуу кагаз берилди.Бардык плиталар инкубациялык мезгил бою бөлмө температурасында сакталган.Термиттер 12, 24, 36 жана 48 сааттан кийин өлүшкөн89,90.Андан кийин 1-теңдеме ар кандай биосурфактант концентрациясында термиттердин өлүмүнүн пайызын баалоо үчүн колдонулган.(2).
Үлгүлөр муз үстүндө сакталып, 100 мл 0,1 М натрий фосфат буферин (рН 7,4) камтыган микротүтүкчөлөргө таңгакталган жана Раджив Ганди атындагы Аквакультура борборунун (RGCA) Борбордук аквакультура патология лабораториясына (CAPL) жөнөтүлгөн.Гистология лабораториясы, Сиркали, Майиладутурай.Андан ары талдоо үчүн район, Тамил Наду, Индия.Үлгүлөр дароо 4% параформальдегидде 37°C температурада 48 саатка бекитилди.
Фиксация фазасынан кийин материал үч жолу 0,1 М натрий фосфат буфери (рН 7,4) менен жууп, этанолдо этап-этабы менен суусуздандырылган жана 7 күн бою LEICA чайырына чыланган.Андан кийин зат чайыр жана полимеризатор менен толтурулган пластикалык калыпка салынып, андан кийин затты камтыган блок толугу менен полимерленгенге чейин 37°Сге чейин ысытылган мешке жайгаштырылат.
Полимеризациядан кийин блоктор LEICA RM2235 микротомунун (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, АКШ) жардамы менен 3 мм калыңдыгына чейин кесилген.Бөлүмдөр слайддарда топтоштурулган, ар бир слайдда алты бөлүм бар.Слайддар бөлмө температурасында кургатылган, андан кийин гематоксилин менен 7 мүнөткө боёлуп, 4 мүнөткө агын суу менен жуулган.Мындан тышкары, эозин эритмесин териге 5 мүнөт сүйкөп, 5 мүнөткө агын суу менен чайкаңыз.
Курч уулануу ар кандай тропикалык деңгээлдеги суу организмдерин колдонуу менен болжолдонгон: 96 сааттык балык LC50, 48 сааттык D. magna LC50 жана 96 сааттык жашыл балырлар EC50.Рамнолипиддик биосурфактанттардын балыктарга жана жашыл балырларга уулуулугу АКШнын Айлана-чөйрөнү коргоо агенттиги тарабынан иштелип чыккан Windows үчүн ECOSAR программалык камсыздоонун 2.2 версиясы аркылуу бааланган.(Онлайн https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model сайтында жеткиликтүү).
Ларвициддик жана антитермиттик активдүүлүктүн бардык сыноолору үч нускада жүргүзүлдү.Личинкалардын жана термиттердин өлүмү боюнча маалыматтардын сызыктуу эмес регрессиясы (дозага жооп берүү өзгөрмөлөрүнүн журналы) 95% ишеним интервалы менен өлүмдүн орточо концентрациясын (LC50) эсептөө үчүн аткарылган жана Prism® (8.0 версиясы, GraphPad Software) Inc. аркылуу концентрацияга жооп берүү ийри сызыктары түзүлгөн. АКШ) 84, 91.
Бул изилдөө Enterobacter cloacae SJ2 тарабынан өндүрүлгөн микробдук биосурфактанттардын чиркей ларвициддик жана антитермиттик агенттер катары потенциалын ачып берет жана бул иш ларвициддик жана антитермиттик аракеттердин механизмдерин жакшыраак түшүнүүгө өбөлгө түзөт.Биосүрфактанттар менен дарыланган личинкалардын гистологиялык изилдөөлөрү тамак сиңирүү трактынын, ортоңку ичегилердин, мээнин кабыгынын бузулушун жана ичеги эпителий клеткаларынын гиперплазиясын көрсөткөн.Натыйжалар: Enterobacter cloacae SJ2 тарабынан өндүрүлгөн рамнолипиддик биосурфактанттын антитермиттик жана ларвициддик активдүүлүгүнө токсикологиялык баа берүү бул изолят чиркейлердин (Cx quinquefasciatus) жана термиттердин (O. obesus) вектордук ооруларын көзөмөлдөө үчүн потенциалдуу биопестицид экендигин аныктады.Биосурфактанттардын негизги экологиялык уулуулугун жана алардын айлана-чөйрөгө потенциалдуу таасирин түшүнүү зарыл.Бул изилдөө биосурфактанттардын экологиялык коркунучун баалоо үчүн илимий негизди түзөт.
Посттун убактысы: 09-09-2024